双水相系统分离纯化南极假丝酵母脂肪酶.pdfVIP

第37卷 第5期 化 学 工 程 Vo1．37No．5 2009年 5月 CHEM1CALENGINEERING(CHINA) May 2009 双水相系统分离纯化南极假丝酵母脂肪酶 杨建军，马晓迅 (西北大学 化工学院，陕西 西安 710069) 摘要：对南极假丝酵母脂肪酶(CAL)在双水相中的分配情况进行了研究，考察了温度 、聚乙二醇(PEG)相对分子质 量、NaC1质量分数和(NH )：s0 质量分数对分配系数K(CAL)的影响，结果表明：温度对K(CAL)影响不大；低相 对分子质量 PEG与蛋 白质的疏水作用可促进 CAL的分配；二相间电势差等对分配平衡、有较大影响。在 PEG 2000／(NH)SO双水相体系中，CAL最佳的萃取分离条件为：室温下，质量分数20％PEG2000，12％(NH)2SO， 1．5％NaC1，此时，(CAL)为8．16，CAL回收率为91．2％。 关键词：脂肪酶；双水相；分离纯化 中图分类号：Q814．1 文献标识码：A 文章编号：1005-9954(2009)05-0049-04 Separation andpurification ofCandidaantarctica lipase in aqueoustwo-phasesystem YANGJian-jun，MAXiao-xun (SchoolofChemicalEngineering，NorthwestUniversity，Xian710069，ShaanxiProvince，China) Abstract：ThepartitionbehaviorofCandidaantarcticalipase(CAL)inaqueoustwo-phasesystem (ATPS)was investigated．Theeffectsoftemperature，relativemolecularmassofpolyethyleneglycol(PEG)，themassfraction ofNaC1and(NH4)2SO4onpartitioncoefficientofCAL (CAL)werestudied．TheresultsshowthatinATPS， temperaturewasunimportantforpartitioncoefficientofCALK(CAL)，whiletheelectricpotentialdifference betweentopandbottom phasewasimportant．ItwasalsodiscoveredthatthelessthemoleculemassofPEG was， themorefavorableconditionsfortheCAL congregation intothephasebecauseofthe increasedhydrophobicity formed．Attheroom temperature，theoptimized extraction conditionswereasfollows：massfraction 20％ PEG 2000，12％ (NH4)2SO4，1．5％NaC1，andK(CAL)was8．16，therecoveryrateofCALwas91．2％． Keywords：lipase；ATPS；purification 固定化脂肪酶催化酯交换反应生产生物柴油 1．2 方法 已成为近年来新能源研究的热点之一。为了消除 1．2．1 蛋白质质量分数测定 杂质的负面影响，提高固定化脂肪酶的催化效率 ， 每一相中总的蛋 白质质量分数在吸光度595nm 本文通过研究聚乙二醇 (PEG)／硫铵双水相系统 处采用 Bradford法测定，以牛血清 白蛋 白为标准蛋 (ATP