车前子多糖抗脂质过氧化作用的研究.docVIP

　　车前子多糖抗脂质过氧化作用的研究 作者：袁从英 熊晨 郭会彩 张然 王素敏 【摘要】 目的 研究车前子多糖对硫酸亚铁维生素C（Fe2+VitC）致大鼠肝微粒体脂质过氧化的影响。方法 通过大鼠肝微粒体的提取，制备Fe2+VitC系统诱导的脂质过氧化损伤模型，检测车前子多糖对丙二醛(MDA) 的抑制作用以及对超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响，观察车前子多糖的抗脂质过氧化作用。结果 车前子多糖显著抑制肝微粒体脂质过氧化，表明车前子多糖具有抑制Fe2+VitC增强肝微粒体脂质过氧化的效应。结论 车前子多糖可能通过与Fe2+络合，降低反应体系中Fe2+游离浓度，而抑制微粒体脂质过氧化。 【关键词】 车前子多糖;抗脂质过氧化;中药药理 【Abstract】 Objective To investigate the effect of semen plantaginis polysaccharides（SPP）on Fe2+VitC induced lipid peroxidation in rat liver microsomal. Methods Fe2+VitCinduced lipid peroxidation damage models icrosomes extraction. The expressions of malondialdehyde (MDA) and superoxide dismutase (SOD) icrosomal. Conclusions SPP may occur through plexation , and inhibit lipid peroxidation. 【Key en plantaginis polysaccharides; Antilipid peroxidation; Herbal pharmacology 现代 研究表明车前子多糖不仅具有整肠通便作用，还有降低血脂，调节血糖及免疫调节功效〔1～3〕。研究发现〔4，5〕：车前子可降低高脂血症大鼠的血脂水平并能提高机体谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）活力及抑制高脂膳食引起的脂质过氧化物（LPO）的升高与超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）的下降，表明车前子可保护高脂机体内抗氧化酶类活性，使多种组织存在的自由基代谢紊乱情况得以纠正，从而维持机体氧化与抗氧化系统的动态平衡，减少自由基的毒副作用，使这些组织的细胞免受自由基损伤。为进一步探讨车前子多糖的抗脂质过氧化作用及其机制，本研究观察车前子多糖对硫酸亚铁维生素(Fe2+VitC)引发的大鼠肝脏微粒体脂质过氧化损伤体外模型的影响。 1 材料与方法 1.1 材料 市售车前子采用微波方法〔8〕提取车前子多糖置冰箱保存备用，SOD和丙二醛(MDA)试剂盒（南京建成生物工程研究所提供），实验动物采用二级SD雄性大鼠，体重（250±10）g（河北省实验动物中心提供，合格证号：804020）。 1.2 方法 1.2.1 大鼠肝微粒体的制备 将大鼠禁食24 h后，颈椎脱臼处死，迅速解剖，取出肝脏，剪去脂肪及筋膜组织，用预冷的生理盐水洗净，滤纸拭干，称重后，剪碎，加入4倍匀浆介质（pH 7.4,0.01 mol/L Tris，0.000 1 mol/L EDTA，0.01 mol/L蔗糖，0.8%氯化钠溶液），并用玻璃匀浆器在冰水中研磨，制成大鼠肝匀浆。在1 000 r/min低温离心10 min，弃沉淀，上清液转移到中速离心管，9 000 r/min低温离心15 min，然后再将上清液转移至高速离心管，40 000 r/min低温离心30 min，沉淀为微粒体。用Log/ml），加入5×10-4FeSO4和5×10-3VitC（终浓度分别为5×10-5和5×10-4）启动反应。37℃水浴保温60 min 取出置冰浴,加17%三氯乙酸1 ml,3 000 r/min离心10 min，去蛋白,取上清液加入0.67%硫代巴比妥酸1 ml，100℃水浴加热40 min，冷却后用多功能微板分析仪在532 nm 处测OD 值。 1.2.3 MDA及SOD测定 将大鼠肝微粒体作为正常对照组（对照组）；以Fe2+VitC系统诱导的脂质过氧化模型为高脂模型组（模型组）；实验组分别在模型组中加入不同剂量的车前子多糖(终浓度分别为50、100、200、400、800 mg/L)。按照试剂盒说明书，用多功能微板分析仪在波长532 nm处，测定MDA光密度值。SOD活性测定方法同MDA，根据试剂盒说明书，用多功能微板分析仪在550 nm处，测定其光密度值。 1.3 统计学处理 数据用x±s表示，采用SPSS12.0软件，行t检验及方差分析。