CEA作业指教书作业指教书2-0.docVIP

癌胚抗原检测作业指导书 1.检验目的： CEA属癌胚胎性抗原，只在胚胎期产生，主要来源于胎儿的胃、肠道和血液。 在正常成人的肠道、胰腺和肝组织中也有少量存在。出生后，CEA的形成被抑 制，因此，在正常成人的血液中CEA很难测出。 患有结肠腺癌的病人，CEA含量通常很高。而在20－50%的良性消化系统及肺部 疾患中，CEA含量通常不超过10ng/ml。吸烟者也常见CEA升高。 CEA测定主要用于指导结肠癌治疗及随访。 CEA测定不适用于普通人群的癌症筛查。因为CEA正常不能排除恶性疾病的存在。 2.检验原理: 采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。 · 第1步：30μl标本、生物素化抗CEA单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗CEA单克 隆抗体和钌（Ru）标记的抗CEA单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。 · 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链 霉亲和素间的反应结合到微粒上。 · 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的 物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。 ·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正， 由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。 3.性能参数： 3.1 线性范围：线性检测结果见CEA方法学验证记录。 3.2精密度:批内n=20,批间n=20。 批 内 间 SDng/ml CV% 均值ng/ml SD ng/ml CV% 0.6231 0.0217 3.48 5.167 0.167 3.23 3.3准确度: 检测结果见临检中心/江苏省室间质评结果回报记录。 3.4 可报告范围: 0.200─50000ng/ml，最大稀释倍数为50倍。 3.5 测量区间：血清/血浆: 0.200─1000ng/ml。 高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。。稀释后的标本CEA含量必须高于20ng/ml。如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。 3.6 灵敏度：0.200ng/ml 3.7特异性：无 4. 样本要求 4.1血清：按标准常规方法采集。 4.2血浆：肝素、EDTA-K3、枸橼酸钠或氟化钠/草酸钾抗凝均可。 4.3标本在2－8 度可稳定2天，-20 度可稳定6个月。只能冻融一次。 4.4含沉淀的标本使用前需离心。 4.5标本和质控品禁用叠氮钠防腐。 5.试剂和设备： 5.1 设备：COBAS6000组合模块E601 （1）检查供水系统是否正常。 （2）检查试剂盖是否松开。 （3）接通仪器左侧上方电源按钮,仪器自检。 （4）登录：输入用户名及密码，仪器初始化，进行自动维护，然后进入Stand by状态。 5.2 试剂厂商：罗氏诊断产品公司 5.3试剂及使用前准备 （1）试剂成分： M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml， 生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。 R1：生物素化的抗CEA单克隆抗体（灰盖），1瓶，8ml。浓度7.5mg/l，磷 酸缓冲液0.1mol/l，pH6.0。含防腐剂。 R2：Ru(bpy)3 2+标记的抗CEA单克隆抗体（黑盖），1瓶，8ml。浓度4.0mg/l， 磷酸缓冲液0.1mol/l，pH6.5。含防腐剂。 （2）试剂准备： 检查各种试剂所需使用的试剂量 （3）试剂贮藏要求： 存放在2－8 度，切莫倒置。 未开封，可稳定至标明的保质期。 开封后，2－8 度 12周； 放在COBAS6000上，8周； 注意：仅供体外诊断使用；避免皮肤直接接触液体试剂；废弃物按生物危害垃圾处理。 6.校准程序： 6.1校准品：罗氏COBAS6000 原装校准品。要求在有效期内使用，过期的校准液应停止使用，保存于2-8℃可稳定到有效期。 复溶：用复溶专用加样枪准确吸取1mL去离子水于瓶中，溶解静置1小时，混匀并用有盖小子弹头分装200μL/个，标明配制日期，校准品批号，配制人以及有效日期，于－20℃冻存备用。 复溶后校准品成分的稳定性：2-8°C 储存。稳定性：未打开，2-8°C有效期内均可打开后，2-8°C 下： 12 周 上机，20-25°C： 只可使用一次（不可反复冻融）。 6.2当下列任何一种情况出现时，请重新校准： ⑴试剂批号改变 ⑵根据质控需要进行校准 6.3 校准步骤： 6．3．1校准品的准备：从-20℃冰箱中取出一个分装的校准品，室温放置使其完全溶解，并颠倒混匀备用。 6．3．2起始定标：进入Calibration，点击Status，选择该项目的定标方式（FULL），点击Save，按在Calibration画面下的Installation界面设置好的