阴虚内热证红斑狼疮治疗前、中、后PBMC基因动态研究.docVIP

　　阴虚内热证红斑狼疮治疗前、中、后PBMC基因动态研究 【摘要】 　　目的研究激素加滋阴清热方 治疗 前、中、后阴虚内热证红斑狼疮（SLE）外周血单一核细胞（PBMC）基因表达的动态变化。方法阴虚内热证SLE患者治疗前、中、后3次外周血单一核细胞基因谱芯片检测与比较。结果找到治疗前、中、后表达有统计学意义的基因20个。结论激素与滋阴清热方可以上调或下调许多基因的表达，从而调节T、B淋巴细胞的的分化与凋亡，减少补体级联反应等导致的炎症反应，调节机体免疫功能而改善病情。 【关键词】 阴虚内热证； 红斑狼疮； 基因芯片 　　Abstract：ObjectiveTo study the dynamic gene expression of the mononuclear cells of the heat deficiency patiants atosus (SLE) before, during and after hormone and Ziyin Qingre formula treatment.MethodsBefore, during and after the treatment, peripheral blood mononuclear cells of the SLE patients ethod ent. ConclusionHormones and Ziyin Qingre formula can up-regucate and doany genes, Regulat T, B lymphocyte differentiation and apoptosis, reduce inflammatory response by lightening plement cascade, and regulate the immune function. 　　Key atosus (SLE); Gene chip 　　红斑狼疮(SLE)是多基因相关的自身免疫性系统性疾病，SLE的发生是由多基因共同作用的结果，在各种致病因素的作用下，多基因的活化或抑制，共同决定了SLE的产生、临床特征及转归。SLE发病中多基因共同作用是明确的，仅观察单一或某一基因家族未能全面地反映机体基因整体的变化，应用基因芯片技术研究SLE基因表达谱的动态变化显得非常必要。前期课题组发现SLE不同证型间存在基因表达的差异［1］，本次我们选择了SLE阴虚内热基本证型患者来进行研究。 　 　1 研究对象 　　轻中度（5≤SLEDAI≤25）阴虚内热证SLE患者从2005-11～2006-11在广东省中 医院 门诊就诊的女性患者（年龄在18～50岁之间）中纳入，总共纳入18例，其中退出2例，失访1例，有效病例共15例。健康对照组来自于广州中医药大学健康大学生和健康志愿者，共15例。纳入、排除、剔除、退出标准见赖梅生博士 论文 （滋阴清热方对阴虚内热证SLE淋巴细胞基因及蛋白表达谱的动态影响。广州中医药大学博士学位论文，2007）。 　　阴虚内热证SLE患者15例，均为女性，最大48岁，最小18岁，平均年龄（31.60±9.37）；健康对照组15例，均为女性，最大42岁，最小18岁，平均年龄（28.4±6.50）。两组年龄经两样本t检验，方差齐性（F＝2.929，P＝0.098），差异无统计学意义（t=1.087，P=0.289）。 　 　2 研究方法 　　2.1 治疗方法 　　2.1.1 滋阴清热方(狼疮Ⅱ号)治疗5粒/次，3次/d，口服。 部分病人阴虚内热证候比较明显时，短期配合使用滋阴清热方汤剂，加强滋阴清热功效。 　　2.1.2 一般治疗及对症处理保护胃粘膜、补钾、补钙、抗感染。西医药除激素外，只根据患者激素用量配合使用泰胃美、雷尼替丁保护胃粘膜。 　　2.1.3 激素治疗所有病例均维持纳入时的激素用量，最高不超过25 mg。 　　2.1.4 疗程疗程一般为3个月。 　　2.2 基因芯片实验方法分别于治疗前、治疗中（6周）和治疗后（12周）采静脉血分离提取单一核细胞，然后按基因芯片技术要求提取总RNA，－70℃保存备用，按完成3个月疗程的先后顺序送检9例患者的27个样本和10例正常人样本，其中4例患者至少有一次样本不符合基因芯片实验要求，最后选择了3次样本均合格的5例患者的15个样本及正常对照组10个样本进行基因表达谱实验，具体方法及资料参见赖梅生博士论文（滋阴清热方对阴虚内热证SLE淋巴细胞基因及蛋白表达谱的动态影响。广州中医药大学博士学位论文，2007）。 　　2.3 微芯人类基因表达谱芯片人类基因表达谱芯片由微芯生物公司采用cDNA直接点样生产，共点有8064个基因点。详细情况参见赖梅生博士论文（滋阴清热方对阴虚内热证SL