REACH法规第五卷译稿–17.docVIP

C.9.生物降解 ZAHN-WELLENS 实验 测定方法 引言 实验目的是为了评估在静态实验条件下水溶液和无挥发性有机物质暴露在高浓度微生物环境中可能的生物终极降解能力。 对悬浮颗粒的物化吸附会发生，并且阐述实验结果时，它的影响也必须计算在内。 被研究物质与浓度相关联的量为，溶解的有机碳在50-400mg/L范围内或者需要的氧量为 100-1000mg/L范围内 。这些高浓度具有分析可靠性高的特点。研究物质与有毒物质结合将延缓或抑制降解过程。 在这种测定方法中，需要氧(COD)或溶解有机碳(DOC)的浓度的测量将用来评估测定物质最终生物降解能力。 实验同时，使用一种精确的分析方法会得出对研究物质（母级化学结构的消失）初级降解能力的评估 这种方法仅对符合以下条件的有机测定物质有效： ——在实验指定的浓度范围之内 ——在实验条件下可溶于水 ——具有可以忽略的蒸汽压 ——对细菌没有抑制作用 ——只有在限制的范围之内可以被实验系统所吸附 ——不能使测定溶液形成泡沫逸出 关于测定材料主要组成部分相关比率的信息在阐明所得到实验结果时是很有用的，尤其在实验结果不太令人满意的情况下更是这样。 有关测定物质对微生物的毒性的信息对低实验结果的阐述以及合适的测定浓度的选择是很必要的。 定义和单位 在实验结束所得到的降解的数量应作为在the Zahn-WeLLens实验中的降解能力记录下来，其中： DT = 在时间T的降解百分比 CA = 实验开始三小时后在测定混合溶液中DOC(or COD)测量实验结果。 CT = 取样时在测定混合液中DOC(or COD)的测量结果 CBA = 实验开始三小时后空白处的DOC(or COD)测量实验结果 降解范围围绕在满百分比附近 降解百分比以实验物质的DOC(or COD)移动百分比为开端 实验开始三小时后的测量实验结果和初始测量实验结果的差别对于测定物质消失可以提供很好的指示。 参考物质 在一些情况下，忽略一些新的物质，参照物将变的很有用处，虽然现在还没有特别的参照物为人们所推荐。 测定方法原理 活性泥土，矿物营养素，测定材料各做为单一的碳资源与水溶液在通风的一至四升的玻璃容器中混合。把混合溶液放在黑暗的或只有散射光的屋子里，通风，并保持温度为20-25摄氏度28天。降解过程由每天或其他合适的时间间隔的过滤溶液DOC(or COD)的测量值来监控。每个时间间隔后降解百分率或降解范围的测量值由实验开始三小时后DOC(or COD)消失的比率来表达。实验结果绘制成时间对降解程度的曲线。 如果使用了一种精确的测量方式，归于生物降解程度的母体分子浓度的改变就可以测量了（初级生物降解） 定量标准 这个实验的再现性已经在一个环状实验中得到证实 这种测定方法的灵敏度在很大程度上取决于空白处的多样性，在一些小的范围内 也取决于溶解有机碳的测定灵敏度和溶液中化合物的测定水平。 1.6 实验过程描述 1.6.1 实验准备 1.6.1.1 反应试剂 测定用水条件：有机碳含量小于5mg/L的食用水。钙镁离子的总浓度不超过2.7mM/L；否则适当的稀释补加蒸馏水或其他稀释物是很必要的。 硫酸：分析纯 氢氧化钠溶液：分析纯 矿物质营养溶液：溶解于一升蒸馏水中。 氯化铵：分析纯 二水合磷酸二氢钠：分析纯 磷酸二氢钾：分析纯 混合物既作为营养溶液又作为缓冲溶液 1.6.1.2 实验仪器 一至四升的玻璃容器（例如：圆柱型容器） 用合适的玻璃或金属棒搅拌。（金属棒应在离容器底部5-10厘米处搅拌）也可以用7-10厘米带磁性的金属棒替代。 用内径为2-4毫米的玻璃管子通空气。管子的开端应该离容器底部大约一厘米 离心分离机（3550转） pH计 溶氧测量仪 过滤纸 过滤薄膜设备 过滤薄膜，有0.45微米的孔隙。如果过滤薄膜既不能让碳通过也不能吸收过滤的物质，那么这种薄膜才是合适的。 测量有机碳含量和氧量的仪器 1.6.1.3 接种体的预备 用离心法或用以上准备的水冲洗从经过生物处理得到生物中得到的活性土壤 活性土壤必须放在一个合适的环境中。从用适当的工作废水处理过的生物处得来的土壤是可以使用的。为了得到尽可能多的不同种类的细菌，应该把不同来源的接种体混合。（例如：经过不同处理的生物 ，土壤，河水等）。混合物就按以上描述的处理方式进行处理。 为了检查活性土壤的活性请看以下的“Functional control” 1.6.1.4