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同型半胱氨酸检测新进展与其I临床价值 练小芬综述，欧国生，李小玲审校(广东省云浮市新兴县人民医院检验科527400) 【关键词】同型半胱氨酸； 心脑血管疾病；循环酶法 D10：10．3969／j．issn．1672—9455．2010．16．064 767—02 中图分类号：R446．112；R543文献标志码：A 文章编号：1672—9455(2010)16—1 同型半胱氨酸(Hey)又称高半胱氨酸(HHey)，是一种含验研究，有在临床使用的报道。其特点与色谱方法相似，但其 硫氨基酸，它不属于组成蛋白质的20种氨基酸，本身不参与蛋 有操作比较复杂、试验耗时较长和试验数据变异比较大等 白质的合成，也没有特异的3个DNA碱基对其进行编码，在缺点。 体内不能合成，它是由蛋氨酸和半胱氨酸代湔过程中产生的重 2．3酶联免疫分析吸附试验(ELISA)[61基本分析原理：先 要的中间产物，只能来源于蛋氨酸的分解代谢。Hcy于1931 使用酶将血样中所有形式的Hcy转变成S-腺苷一L—Hcy，然后 du 年由Vincent Vigneaud首次从膀胱结石中分离出来，它是加入酶标的抗孓腺苷一I，一Hcy的单克隆或多克隆抗体。采用竞 一种含硫的氨基酸。1969年，Kilcken MeCully第一次指出争结合的原理，将不同水平的标准品与酶标抗体竞争结合，然 Hcy患者的血管病变是由于高水平的Hey引起，从此Hey备后以显色试剂和终止试剂分别进行显色和终止，制作出Hcy 受关注。大量研究征明，Hcy是心脑血管病的独立危险因子． 浓度与发色强度的标准曲线。样品也按相同步骤处理，在标准 危险度随Hey浓度的升高而增加[1。3]。但到目前为止，Hcy的 曲线上就可以查出其Hcy的浓度。是临床上测定Hey水平的 检测只局限于研究性质的科研单位和大型医院实验室，而基层 常用方法．其特点是操作比较方便、快捷，重复性好，方法稳定、 医院的医务工作者对心脑血管危险冈子的认识还停留在早已 可靠。缺点是大部分操作还是手工操作，比较耗时等。 家喻户晓的血脂上。因此，宣传Hcy的临床价值和在基层医 2．4荧光偏振免疫法(FPIA)L7。基本分析原理：样品中游离 院实验室开展Hey的检测成为当务之需。为此，作以下综述。 Hcy和抗单克隆抗体相结合的Hcy的荧光偏振强度不同，将 1 Hcy升高原因 样品、标准品与标抗体竞争结合。采用竞争结合的原理制作出 大多数学者认为．高Hcy原因主要有以下几方面：(1)不Hcy浓度与荧光偏振强度的标准曲线，在标准曲线上就可以查 健康生活方式、营养不良、B族维生素(Vit)缺乏。饮食中高动出其Hey的浓度，是临床』二测定Hcy水平的比较好的方法。 物蛋白摄人过多，使蛋氨酸含虽过高；长期酗酒，引起肝细胞蛋 该方法完全自动化仪器分析，具有快速、准确、方便的优点，受 氨酸合成酶活性下降；VitB。、VitB-z和叶酸摄入不足，使其作为到临床医师们的欢迎，但需专门仪器，且试剂昂贵。 代谢辅酶活性下降。(2)遗传因索主要是C667T点突变、CBS2．5循环酶法[8]是近几年出现的新方法，其原理是利用小 基因多态性和蛋氨酸合成酶基冈多态性。(3)肾小管内皮细胞 的胱硫醚一睁合成酶对Hcy起转化作用，因此，肾功能不全可使 三一乙一羧乙基膦(T(3Ep)作用下．氧化型Hcy被转化为游离型 Hcy水平升高。(4)其他因素，如药物(一氧化氮、氨甲蝶呤、避Hcy．后者通过与共价底物§腺苷甲硫氨酸反应，生成蛋氨酸 孕服药、抗癫痫药等)、年龄、性别等。 2 Hcy检测方法 环反应放大信号，同时产生腺苷，腺苷立即水解成氨和次黄嘌 2．1 高效液相色谱法(HPI。C)Ⅲ是目前公认的参考方法， 呤，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下。使NADH转化为NAD+，样 基本分析原理：先使用还原剂使血样中所有形式的Hcy转变 本中的Hcy含量与NADH转化速率呈正比。循环酶法可用 成还原形式。然后与荧光试剂进行衍生生成Hcy．荧光物质复 自动生化