第36卷第13期第三军医大.PDFVIP

第３６卷第１３期 第　三　军　医　大　学　学　报 Ｖｏｌ．３６，Ｎｏ．１３ ２０１４年７月１５日　　　　　　　　　　 Ｊ　Ｔｈｉｒｄ　Ｍｉｌ　Ｍｅｄ　Ｕｎｉｖ 　　　　　　　　　　 Ｊｕｌ．１５　２０１４ １３４５ 文章编号：１０００５４０４（２０１４）１３１３４５０５ 论著 基因芯片法快速检测脊柱结核临床分离株ＳＭ、ＥＭＢ、ＬＶＦＸ、ＡＭＫ、ＣＰＭ耐药 １ １ １ ２ ２ １ １ １ １ １ 程　鹏 ，张泽华 ，李力韬 ，张冠斌 ，郭　永 ，罗　飞 ，周　强 ，代　飞 ，何清义 ，许建中　　（４０００３８重庆，第三 １ ２ 军医大学西南医院骨科，全军矫形外科中心 ；１０２２０６北京，生物芯片北京国家工程研究中心 ） 　　［摘要］　目的　制备一种用于检测链霉素（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ，ＳＭ）、乙胺丁醇（ｅｔｈａｍｂｕｔｏｌ，ＥＭＢ）、左氧氟沙星（ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ， ＬＶＦＸ）、阿米卡星（ａｍｉｋａｃｉｎ，ＡＭＫ）、卷曲霉素（ｃａｐｒｅｏｍｙｃｉｎ，ＣＭＰ）耐药基因的新型微阵列芯片，测试其快速检测脊柱结核 临床分离株耐药的效果。方法　 根据ＳＭ、ＥＭＢ、ＬＶＦＸ、ＡＭＫ、ＣＰＭ５种药物的常见耐药基因及突变位点（ｒｐｓＬ、ｒｒｓ、ｅｍｂＢ、 ｒｒｓ及ｇｙｒＡ），制备ＤＮＡ微阵列芯片，脊柱结核临床分离株耐药菌株１１１株及敏感菌株２６株，均具备完整的临床信息及药 敏结果，依次进行灭活、核酸提取、ＰＣＲ扩增、芯片杂交、洗涤与扫描判读，与表型药敏结果对照，计算敏感度、特异度及９５％ ＣＩ。结果　检测时间１８～２３（２０．１±１．２）ｈ。与表型药敏结果对照，基因芯片检测ＳＭ、ＥＭＢ、ＬＶＦＸ、ＡＭＫ、ＣＰＭ耐药的敏感度 分别为９０．３６％、６１．９０％、９４．５９％、６６．００％、６５．５２％，其对应的特异度分别为７０．３７％、５８．１１％、５８．００％、９１．９５％、８０．５６％； 在２６株全敏感菌株中，结果均显示为野生型，对５种抗结核药物耐药检测的特异度均为１００％。结论　 基因芯片法检测结 核耐药耗时短，一线、二线耐药检测的敏感度、特异度令人满意，生物安全性高，能够满足临床耐多药结核快速诊断需要。 　　［关键词］　 基因芯片；脊柱结核；耐药 　　［中图法分类号］　Ｒ３７２；Ｒ４４６．７；Ｒ５２９．２　　 ［文献标志码］　Ａ ＲａｐｉｄｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＳＭ／ＥＭＢ／ＬＶＦＸ／ＡＭＫ／ＣＰＭｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｂｙＤＮＡｍｉｃｒｏａｒｒａｙｆｏｒ ｃｌｉｎｉｃａｌｉｓｏｌａｔｅｓｆｒｏｍｓｐｉｎａｌｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ １ １ １ ２ ２ １ １ １ １ ＣｈｅｎｇＰｅｎｇ，ＺｈａｎｇＺｅｈｕａ，ＬｉＬｉｔａｏ，ＺｈａｎｇＧｕａｎｂｉｎ，ＧｕｏＹｏｎｇ，ＬｕｏＦｅｉ，ＺｈｏｕＱｉａｎｇ，ＤａｉＦｅｉ，ＨｅＱｉｎｇｙｉ， １ １ ＸｕＪｉａｎｚｈｏｎｇ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｒｔｈｏｐａｅｄｉｃ，ＣｅｎｔｅｒｏｆＯｒｔｈｏｐａｅｄｉｃＳｕｒｇｅｒｙ，ＳｏｕｔｈｗｅｓｔＨｏｓｐｉｔａｌ，ＴｈｉｒｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， ２ Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，４０００３８；ＮａｔｉｏｎａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｆｏｒＢｅｉｊｉｎｇＢｉｏｃｈｉｐＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ，１０２２０６，Ｃｈｉｎａ） 　　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　 ＴｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙａｎｄｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆｎｅｗｌｙｓｅｌｆｄｅｓｉｇｎｅｄＤＮＡｍ