单克隆抗体精选.ppt

* 请拿出你的导学案，课本，双色笔，还有你的动力和激情！ 全力投入会使你与众不同 你是最优秀的，你一定能做的更好！ 温故知新 动物细胞工程常用的技术手段有 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体 细胞增殖 细胞膜的流动性 刘海红 武安市第三中学 【学习目标】 1.简述单克隆抗体制备的原理、过程。（重点） 2.通过合作探究掌握杂交瘤细胞的制备和筛选。（重点、难点） 3.了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说其应用实例。（重点） 我的舞台我做主 要求： ①讨论完成的组改正答案，巩固落实。 展示同学迅速、脱稿；展示内容必须经过全组的共同讨论。 ②点评同学要面朝大家，声音洪亮，对问题理解深入，讲解时思路清晰。 任务 展示 点评 探究一 单克隆抗体制备前的准备（目标1） 探究二 单克隆抗体的制备 （目标1、2） 6-11 探究三 单克隆抗体的应用目标（3） 总结 课堂检测 抢答 1-5组 12组 自由点评 思维碰撞（约5分钟） 【问题1】抗体是什么？ 如何产生？ 抗体分布在哪里？ 探究一制备单克隆抗体前的准备 可与相应抗原发生特异性 结合的免疫球蛋白 机体接收抗原刺激后，B细胞增 殖分化为浆细胞，分泌产生抗体。 主要分布在动物血清 【问题2】长期以来，人们是如何获得抗体的方法？ 此方法的缺陷是什么? 该法制备抗体的缺陷： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 动物体内 抗体 抗原 浆细胞 血清 （抗原不纯） （抗体不纯） 【问题3】一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌几种抗体？免疫反应中产生的浆细胞种类有多少？ 【问题4】能否通过动物细胞培养技术得到大量产生单一抗体的浆细胞？为什么？ 【问题5】如何使浆细胞获得无限增殖的能力？ 一种 不能 ；浆细胞在体外培养条件下不能无限增殖 很多种，多达百万种以上 让浆细胞与能在体外培养无限增殖的骨髓瘤细胞融合 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 主要成就：制备出单克隆抗体. 于1984年获得诺贝尔奖 单: 单个细胞 克隆: 无性繁殖 单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质单一特异性强的抗体 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 融合 单克隆抗体 1.该实验用的是小鼠的哪两种细胞融合？ 融合后的细胞具备何种特性？ 【问题1】 既能够在体外大量繁殖， 又能产生特定的单克隆抗体。 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 融合 单克隆抗体 .实验过程如何获得效应B细胞？ 【问题2】 小鼠的脾脏细胞中；多种 从何处获得效应B细胞？获得效应B细胞是一种吗？ 注射抗原 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 融合 单克隆抗体 诱导细胞融合的手段有哪些？ 【问题3】 聚乙二醇、灭活的病毒、 电激 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 融合 单克隆抗体 4.在培养基中可能有几种细胞？若细胞两两融合后，有几种融合情况？ （B） （G） B G BB GG BG BB GG BG 选择性培养基 筛选1 【问题4】 Q1 Q2 * 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 融合 多种杂交细胞 选择性培养基 筛选1 单克隆抗体 5.经过筛选后的杂交瘤细胞有几种？如何得到产生单一抗体的杂交瘤细胞？ （B） （G） 克隆化 专一抗体检测 筛选2 【问题5】 有限稀释法 稀释多次 稀释 将培养皿孔内的上清液取出，检测抗体。 抗原 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 融合 多种杂交细胞 选择性培养基 筛选1 专一抗体检测 克隆化 单克隆抗体 有限稀释法培养 筛选2 4.如何制备大量的单克隆抗体？ 体外条件下大规模培养 小鼠腹腔内增殖 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 融合 多种杂交细胞 选择性培养基 筛选1 专一抗体检测 克隆化 单克隆抗体 有限稀释法培养 筛选2 细胞制备 细胞融合 细胞筛选（两次） 细胞培养 讲 一 讲 【小结】 2.产生抗体的细胞是_______________ 产生单克隆抗体的细胞是__________ 效应B细胞（浆细胞） 杂交瘤细胞 3.杂交瘤细胞的特点: _______________________________ 4.第一次筛选是为了获得_____________ 第二次筛选时为了获得 _______________________________ 既能无限增殖，又能分泌特异性抗体 杂交瘤细胞 既能无限增殖，又能分泌特异性抗体的杂交