结核分枝杆菌IFN-γ酶联免疫斑点检测的建立和初步应用.pdfVIP

144 • 中国防if4耳之 2009 年 3 月 第 31 卷第 3 期 ·论著· 结核分枝杆菌 IFN-γ 酶联免疫斑点检测 的建立和初步应用 杨倚婷1 徐平2 曾剑锋1 朱秀云1 黄华1 邓群益l 刘国辉l 周伯乎1 陈心春l (1.深圳市东湖民院(广东医学院附属深圳第二三医院) 深圳 518020 ;2. 北京大学深圳医院 深圳 518036) 摘要:目的 建立结核分枝杆菌特异性 IFN-y 酶联免疫斑点 (Elispot) 检测技术，初步评价其在 诊断结核分枝杆菌感染的敏感性和特异性。方法 采用以早期分泌抗原靶 6kDa 蛋白 (ESAT-6 )抗 原为主的重组蛋白库、多肤库为抗原，建立结核分枝杆菌特异性 IFN-yElispot 检测技术(简称 Elis­ pot) ;应用该技术对 32 例肺结核病患者、205 例健康对照者和 18 例肺部其他疾病对照的外周血结核 菌特异性 IFN-y 水平进行检测;结核病人和部分健康对照同时采用全血干扰素试剂(Quantiferon- TB-Gold , QFT-G) 进行平行检测。结果 采用 Elispot 检测，结核患者的阳性率最高 (75.0%) ，显著 高于健康对照(7.3%) 和其他肺部疾病患者01. 1%) ，结核患者反应水平与其他两组比较均差异有统 计学意义(PO. 05 ,P0. 05) 。采用 QFT-G 在结核病人中的 IFN-γ 应答阳性率为 78.1% ，与 Elis­ pot 检测结果进行配对比较无显著性差别 (l= 1. 6 ， P0.0日。结论 建立了结核菌特异性 IFN-y Elispot 检测技术，该技术在诊断结核菌感染的初步应用显示出较好的特异性和敏感性，但仍需进一 步扩大样本数观察。 关键词:结核，肺/诊断;分枝杆菌，结核 z 干扰素 H 型;免疫酶技术 Development of Elispot assay for diagnosis of pulmonary tuberculosis Yang Qianting 1 , Xu Píng 2 , Zengjianfeng 1 , Zhu Xiuyun 1 , Huang Hua 1 , Deng Qunyi 1 , Liu Guohui , Zhou Boþing , Chen Xinchun 1. Shenzhen Donghu Hosþital , Shenzhen 518020 , China 2. Shenzhen hosþstal 0f Beijing universi吵 ， Shenzhen 518036 , China Abstract: Objective To develop Elispot assays for detection of Mycobacterium tuberculosis anti- gen-specific IFN-yin peripheral blood and evaluate its applicability in diagnosis of pulmonary tuber- culosis. Methods Recombinant protein library containing the early secretary antigen target 6 kDa protein (ESAT-6) and peptide library were used as antigens to develop an Elispot assay for measur- ing antigen-specific IFN-y. IFN-yresponses in peripheral bloods were determined in 32 patients with pulmonary tube