羧甲基壳聚糖对口腔变形链球菌和口腔乳酸杆菌的抑制作用.pdfVIP

第 22卷第4期 南京师大学报(自然科学版) Vo】22 No { 1999年 JOURNAL OF NANJ1NG NoRMAL UNIVERSITY(Nat… 】Science) 文章编号：1001--4616(1 999)04--0073 04 @ 羧甲基壳聚糖对口腔变形链球菌和 7弓一76 口腔乳酸杆菌的抑制作用 尺 z 刘瑾，唐梓进 、．— — — ～ ， _ — — 一 摘要 从人的口腔中取少量牙垢，经过口腔变形链球菌和口腔乳酸杆菌普通培养基培养．再经过 专性选择培养基分离厦进一步纯化，得到口腔变形链球菌和口腔乳酸杆菌，并进行纯种鉴定，用比 浊法测定擐甲基壳聚精(cMcTs)对过两种菌的抑制作用．结果表明：CMCTS对这两种菌都有一 定的抑制作用． 关键词 ． 旦量变形{望!苎 腔 璧堑要：兰!苎查兰兰 中国分类号 R780．2 抑刳啤用 O 弓l言 口腔变形链球菌和口腔乳酸杆菌是诱发人类产生龋齿的主要微生物“’”]．口腔链球菌是人 类口腔中数量最多、分布最广的菌群，是牙菌斑早期定植菌，在初期菌斑中链球菌占j0 以 上0一．r7腔乳酸杆菌的耐酸力强，在强酸环境中能够生存并继续发酵糖产酸，使牙釉质与牙本 质脱钙，目前这两种菌被公认为龋齿的主要致病菌 ]．羧甲基壳聚糖(CMCTS)的衍生物具有 抑菌作用 ，但CMCTS对这两种菌的抑制效果还未见报道． 1 材料与方法 1．1 材料 羧甲基壳聚糖(CMCTS)由本实验室制各及纯化． 口腔乳酸杆菌选择培养基参见[1]． 盐溶液：MgSO ·7H 2O 11．5 g，MnSO ·2H2O 2．86 g，FeSO4·7H：O 0．68 g，蒸馏水lO0 mL． 水浴上加热使上述成分溶解，用 1 mol／I HCI和4O NaOH调pH至4，7，121℃灭菌2O min，仅口腔乳酸杆菌能生长，若pH调至 5．4，则口腔变形链球菌也可生长，可作为口腔变形 链球菌的选择培养基． 口腔变形链球菌和唾液链球菌选择培养基 ]：胰蛋白陈2O g，葡萄糖 1 g，蔗糖 50 g，磷酸 氢二钾4 g，琼脂20 g．水1 000mI ． 按上述成丹混合，加热溶解调 pH至 6，8～7．2，加 1 台酚蓝 7．5 mI～0 01 结晶紫溶液 8 mI ，混合均匀，经 121 c、1 5 min高压灭菌冷却到 55 C时加1 亚碲酸钾溶液 0，5 mI ， 收稽日期： 999—05—2 5． 基金项目：江苏省九五科拄攻关项目的于课题(BE 90048) 作者单位；南京师范大学大自然生物工程盛司．210097-南京 73 南京师大学报(自然科学版) 第 22卷第4期(1999年 1：1腔变形链球菌普通培养基 一：胰蛋白胨 10 g，葡萄糖 1 g，蔗糖 50 g，磷酸氢二钾4 g，牛 肉浸粉3 g，酵母浸出粉 5 g，琼脂 20 g，盐溶液5 ml ，水l 000 mI ，pH 6．8～7．2． 1．2 方法 1．2．1 口腔变形链球茵和口腔乳酸杆茵的分离与鉴定 用牙签取少量牙垢，在超菌台中均匀混于无菌水中，用玻璃推杆平铺于 pH 5．4的1：1腔变 形链球菌、口腔乳酸杆菌选择培养基平板上，37℃培育 2 d，再于 pH 7．0的口腔变形链球菌选 择培养基和 pH 4．7的口腔乳酸杆菌选择培养基平板上划线分离，37℃培养．培养出的菌落 分别作菌种保存． 革兰氏染色法参见[83． 过氧化氢酶检测参见[93． 糖发酵试验参见[9，10]． 1．2．2 CMCTS与庆大霉素对口腔变形链球茵的抑制作用(比浊法)