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香菇多糖协同阿糖胞苷对HL.doc
香菇多糖协同阿糖胞苷对HL
作者:吴东红 王翠莲 张宇明 陈永振
【关键词】 香菇
摘要:目的: 研究 香菇多糖协同阿糖胞苷(Ara-c)对HL-60白血病细胞增殖力的 影响 。 方法 :观察HL-60细胞,分别经香菇多糖、Ara-c或香菇多糖协同Ara-c处理后,HL-60活性、抑制率及集落形成能力的变化,并与对照组(不含处理因素)比较。结果:香菇多糖协同Ara-c组HL-60细胞集落形成能力、增殖抑制率与其他三组比有显著差异,HL-60细胞活力与Ara-c组比无显著差异;香菇多糖组与对照组比各项指标均无显著差异。结论:香菇多糖能增强Ara-c对HL-60细胞的杀伤力。
关键词: 香菇多糖;Ara-c;HL-60;杀伤力
The Effects of Lentinan Polysaccharide and Ara-c on theAbility of HL-60 Cells Proliferation
Abstract: Objective:To study the effects of lentinan polysaccharide and Ara-c in the ability of proliferation on HL-60 cells. Method:Observing the activity, inhibited-rate and the colony-formation-ability of the HL-60 cells in lentinan polysaccharide-Ara-c group, lentinan polysaccharide group, Ara-c group and control group. Result: The differences in colony-formation-ability and inhibited-rate of the HL-60 cells beter pared etes. Conclusion:Lentinan polysaccharide helps to enhance the ability of Ara-c in killing the HL-60 cells.
Key L ,上海试剂二厂) 、新生小牛血清(杭州四季青)、胰蛋白酶(Gibco U.S.A)、四甲基偶氮唑(MTT)(Sigma, U.S.A)、Ara-c (深圳万乐药业)。HL-60 细胞株(本院生化教研究传代培养)。
1.3 方法和步骤
1.3.1 HL-60 细胞培养:培养体系为RPMI 1640(含10 %小牛血清、青霉素100 U/ml,链霉素100mg/L), 置CO2培养箱内,于5%CO2、37℃,饱和湿度条件下进行传代培养,3d半量换液, 视细胞生长速度约每3天传代一次。
1.3.2 实验分组:①香菇多糖+Ara-c组;②香菇多糖组;③Ara-c组;④单纯液体培养对照组。
1.3.3 采用台盼蓝排斥实验, 检测细胞活力, 计算 活细胞率, 取活细胞率gt;95%的HL-60白血病细胞用于实验。将HL-60白血病细胞用培养液制成1×106/ml的细胞悬液,各取1ml, 分4组种于24孔培养板,平行3孔,重复2板,分别加入:①香菇多糖、Ara-c,②香菇多糖,③Ara-c,对照组:含HL-60 细胞悬液1ml(不含处理因素)。置于孵箱37℃、5%CO2继续孵育1d。 Ara-c浓度为2.75mg/L,香菇多糖浓度100mg/L参照 表1 不同培养条件对HL-60活细胞率(%)、集落形成总数(CFU)的 影响 (略)
表2 不同培养条件对吸光度(A)及白血病细胞增殖抑制率(IR)的影响(略)
2.2 香菇多糖+Ara-c组及Ara-c组白血病细胞增殖抑制率与香菇多糖组或正常对照组比均有显著性差异(Plt;0.01),香菇多糖+Ara-c组白血病细胞增殖抑制率高于Ara-c组(Plt;0.05),香菇多糖组与正常对照组比较无显著差异(Pgt;0.05)。
3 讨论
近年来,香菇多糖的 研究 引起人们的重视,研究者发现,香菇多糖是一种重要的生物调节剂,尤其在抗肿瘤 治疗 方面, 香菇多糖已作为一种较好的辅助药物运用于临床。就恶性肿瘤而言,多数患者伴有细胞免疫功能缺陷、免疫监控失调,另外化疗、放疗、手术等治疗手段的运用,使机体的免疫力进一步受损,导致机体免疫功能低下,香菇多糖能够提高机体的免疫力,从而间接发挥抑制肿瘤的效应。Kimura Y等人用香菇多糖与化疗药物联运用治疗初治及复发的胃癌,研究发现香菇多糖能够减少化疗副作用、提高各项免疫指标及营养指标,改善胃癌患者的免疫及营养低下状态, 并认为香菇
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