高效液相色谱法测定大鼠海马胆固醇.docVIP

　　高效液相色谱法测定大鼠海马胆固醇 作者：谭来勋, 孙圣刚, 王细林, 李效宽,梅之南，张双国 【关键词】 胆固醇 【关键词】 高效液相色谱法L;胆固醇;大鼠海马;紫外检测器 　　0引言 　　胆固醇不仅在动脉粥样硬化等心血管疾病的发生 发展 中至关重要，而且在中枢神经系统的发育和功能活动中起着关键性作用［1］. 本资料用相对简单的高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)法测定了不同发育时期的大鼠海马胆固醇含量. 　　1材料和 方法 　　1.1材料 　　湖北省医学 科学 院实验动物中心提供健康雄性a公司产品. VARIAN Prostar 210高效液相色谱仪 (美国VARIAN公司生产),配置Prostar 210高压泵、VARIAN Prostar 500柱温箱、手动进样器. 　　1.2方法 　　1.2.1组织样品制备将大鼠快速活杀断头取海马称质量,按10 mL/g加无水乙醇在冰台上磨成匀浆,在20 600 g, 4℃离心2次，每次20 min,将上清液以0.45 μm的微孔滤膜滤过, 取滤液分装, -70℃保存待测. 　　1.2.2配制标准溶液和测定胆固醇标准胆固醇储备液(1 g/L):准确称取胆固醇66.18 mg溶于25 mL的无水乙醇中. 标准胆固醇工作液:取标准胆固醇储备液,分别以无水乙醇稀释使其浓