鹅掌草根茎主要皂苷成分的含量测定的论文.docVIP

　　鹅掌草根茎主要皂苷成分的含量测定的论文 作者：韩林涛，黄芳，周云云，余尚工，方念伯 【摘要】 目的分析测定鹅掌草中主要皂苷成分之一anhuienoside e的含量。方法采用c18柱(沃特斯公司，xterra rp18 3.5 μm，4.6 mm×150 mm)，流动相为甲醇-水(58∶42)，流速1 ml/min，检测波长209 nm。结果皂苷anhuienoside e在2.14～10.70 μg范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 6)，平均回收率为100.6% ，rsd=1.28% (n=6)。结论该方法简便，灵敏，重复性好，可作为鹅掌草中主要皂苷成分anhuienoside e的含量测定方法。 【关键词】 anhuienoside e； 鹅掌草； 高效液相色谱 　　abstract：objectiveto determine anhuienoside e in rhizome of anemone flaccida by hplc. methodsanhuienoside e column(4.6 mm×150 mm) obile phase of methanol-．resultsthe calibration curve ethod is simple， sensitive and precise. it can be used for the determination of anhuienoside e in rhizome of anemone flaccida. 　　key one flaccida； hplc 　　鹅掌草anemone flaccida fr. schmidt系毛茛科银莲花属多年生植物。.该属植物约有150种，世界各大洲均有分布，我国有54种，除海南省外，其它各省均有分布［1，2］，其中鹅掌草在湖北省西部有广泛的分布［1］。该属植物可作药用的有竹节香附a. raddeana、鹅掌草a. flaccida、草玉梅a. rivularis等数种，多以根或根茎入药，具有祛风湿、消肿解毒等功效［1］。现代药理研究表明， 鹅掌草根茎(又名地乌)有抗肿瘤、抗炎、解热镇痛、镇静、抗惊厥等作用，其有效成分为三萜皂苷类 ［2～4］。本文建立了hplc法测定鹅掌草中分离得到的主要皂苷成分anhuienoside e含量，以后将陆续报道其他含量较高皂苷类成分的含量测定，目的是为进一步开发鹅掌草提供理论和实验依据，使得湖北省西部地区广泛分布的这一植物资源得到更科学合理的利用。 　　1 仪器及试药 美国agilent 1100serious高效液相色谱仪：四元泵、在线脱气机、柱温箱、可变波长紫外检测器；上海科导超声仪器有限公司bd-2型超声波清洗器(功率：450r，ms和文献对照［4］，检定为anhuienoside e，即3-o-α-l-吡喃鼠李糖 (1→2) -β-d-吡喃葡萄糖-齐墩果酸-28-o-α-l-吡喃鼠李糖 (1→4) -β-d-吡喃葡萄糖 (1→6)-β-d-吡喃葡萄糖苷，经hplc按峰面积归一化法检查纯度为99.5%］。鹅掌草根茎采集自湖北省五峰县，中国科学院武汉植物园袁晓博士鉴定，凭证标本保存于湖北中医学院中药标本馆(no。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件c18柱(，4.6 mm×150 mm)，流动相：甲醇-水(58∶42)，流速：1 ml/min，柱温：40℃，检测波长：209 nm。进样量：对照品溶液和供试品溶液各5 μl。理论塔板数以anhuienoside e峰计不低于2 000。结果见图1～2。 　　2.2 对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的皂苷anhuienoside e对照品10.70 mg，置10 ml量瓶中，加入甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得。 　　2.3 供试品溶液的制备取鹅掌草根茎粉末0.15 g，精密称定，置10 ml量瓶中，加入60%甲醇8 ml超声提取30 min，放冷，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.22 μm)滤过，即得。 　　2.4 线性关系考察取对照品溶液2，4，6，8，10 μl分别进样，按“2.1”项下色谱条件测定峰面积，以峰面积a对进样量m(μg)进行回归，标准曲线为：a=148.640 6m-1.375 41，r=0.999 6 ，其线性范围为2.14 ～10.70 μg。 　　2.5 精密度实验取第1批次本品粉末0.15 g，按“2.3”项下的方法制备供试品溶液，取该供试品溶液，连续进样5次，对峰面积进行考察，峰面积的rsd为1.17%，结果表明其精密度良好。 　　2.6 稳定性实验取同一份供试品溶液，分别于0，1，2，4，8 h不同时间间隔点样进样分析，对峰