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流式细胞术实验方法染色操作步骤将单细胞悬液加入圆底离心管中离心弃上清液加入离心洗涤次弃上清加入预冷的酒精固定或是固定过夜离心弃上清液用洗涤次离心加入工作浓度于中孵育离心用洗涤次离心加入工作浓度于中室温避光孵育混匀过目筛网置流式管中冰箱保存待测染色操作步骤将单细胞悬液加入圆底离心管中离心弃上清液加入离心洗涤次弃上清加入预冷的浓度根据细胞的特点进行调节固定以下步骤同染色操作步骤的细胞表面直接免疫荧光染色操作步骤将单细胞悬液加入圆底离心管中离心弃上清液以冷离心洗涤弃上清液加入用稀释的荧光素标记的抗体用
流式细胞术实验方法
PI 染色操作步骤
1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中，离心，1500rpm , 5min，弃上清液。
2、加入PBS 1ml离心洗涤1次，弃上清。
3、加入2ml预冷的70%酒精，4℃固定30min，或是-20℃固定过夜。
4、离心，弃上清液。
5、用1×PBS 1ml洗涤1次，离心。
6、加入RNase A (工作浓度20ug/ml)于500ul 1×PBS中，37℃孵育30min，离心。
7、用1×PBS 1ml洗涤1次，离心。
8、加入PI(工作浓度50ug/ml) 于500ul 1×PBS中，室温避光孵育30min。
9、混匀，过300目筛网，置流式管中，
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