第四节 核酸的分.pptVIP

带有DNA片段的凝胶 DNA分子 限制片段 限制性酶切割 琼脂糖电泳 至膜（尼龙膜或硝酸纤维素滤膜）上 转膜 杂交、显影 凝胶 滤膜 用缓冲液转移DNA 吸附有DNA片段的膜 Southern 印迹杂交的技术流程 * （二）Northern印迹杂交 与Southern杂交类似。检测目的RNA的存在与否及含量。 * （三）Western印迹杂交 将待检测蛋白质（或酶）经PAGE电泳并染色后，转移到滤膜上固定，再用“抗体-抗原”免疫反应或“DNA-protein”结合反应鉴别滤膜上的蛋白质。 * （四）斑点印迹杂交和狭线印迹杂交 Dot blotting and slot blotting 直接将样品点样于固相支持物上。适合于核酸样品的定性检测，而不是定量检测。 * (五）原位杂交in situ hybridization 将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交，称为原位杂交。 特点 能在成分复杂的组织中进行单一细胞的研究 不需从组织或细胞中提取核酸，对含量极低的靶序列灵敏度高 能准确反映组织细胞的相互关系及功能状态 * * 多肽激素与蛋白质多用碘标记，最常用的是125I。碘化反应的基本过程如下：通过氧化剂 的作用，使碘化物（125I-）氧化成的碘分子（125I2），再与多肽激素、蛋白质分子中的酪 氨酸残基发生碘化作用。 第四节 核酸的分子杂交