牡丹花器官基因PsAP2的克隆与分析.PDFVIP

　 应用研究欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－８１０１．２０１３．０６．００７ 牡丹花器官基因ＰｓＡＰ２的克隆与分析 高燕，蒋昌华，宋篧，叶康，奉树成 （上海植物园，上海城市植物资源开发应用工程技术研究中心，上海２００２３１） 摘　要：采用同源基因克隆和ＲＬＭ－ＲＡＣＥ法，从牡丹品种‘凤丹’花器官中克隆了ＰｓＡＰ２，其ｃＤＮＡ全长２１３８ｂｐ， 包含１个长为１５３３ｂｐ的开放阅读框编码５１０个氨基酸。ＢｌａｓｔＸ比对发现，ＰｓＡＰ２与许多植物的ＡＰＥＴＡＬＡ２蛋白 同源性高达７０％以上；与芍药、葡萄、可可树和杨树的相似率分别为９７％、７２％、６８％和６３％。基因结构分析发现， ＰｓＡＰ２编码区基因组片段为２４７７ｂｐ，含有 １０个外显子和９个内含子，均符合 ＧＴ－ＡＧ法则。亚细胞定位表明， ＰｓＡＰ２定位于细胞核中，暗示其发挥转录因子的功能。ＰｓＡＰ２的获得将为后续功能分析提供基础，为牡丹花型分子 育种提供候选基因。 关键词：牡丹；花发育；ＡＰ２；转录因子 ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｏｆｇｅｎｅＰｓＡＰ２ｆｒｏｍｆｌｏｒａｌｏｒｇａｎｏｆＰａｅｏｎｉａｓｕｆｆｒｕｔｉｃｏｓａＡｎｄｒ．∥ＧＡＯＹａｎ，ＪＩＡＮＧ Ｃｈａｎｇｈｕａ，ＳＯＮＧＹａｏ，ＹＥＫａｎｇ，ＦＥＮＧＳｈｕｃｈｅｎｇ Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＡｆｕｌｌｌｅｎｇｔｈｃＤＮＡｗａｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｆｌｏｗｅｒｏｆｔｒｅｅｐｅｏｎｙ（ＰａｅｏｎｉａｓｕｆｆｒｕｔｉｃｏｓａＡｎｄｒ．）‘Ｆｅｎｇｄａｎ’，ｎａｍｅｄａｓ ＰｓＡＰ２，ｕｓｉｎｇｔｈｅｄｅｇｅｎｅｒａｔｅｄＲＴ－ＰＣＲａｎｄＲＬＭ－ＲＡＣＥ．ＰｓＡＰ２ｃＤＮＡｗａｓ２１３８ｂｐｉｎｌｅｎｇｔｈ，ｈａｒｂｏｒｉｎｇａｎｏｐｅｎｒｅａｄ ｉｎｇｆｒａｍｅｏｆ１５３３ｂｐｃｏｄｉｎｇ５１０ａｍｉｎｏａｃｉｄｓ．Ｓｅｑｕｅｎｃｅａｌｉｇｎｍｅｎｔａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｓｅｑｕｅｎｃｅｅｎｃｏｄｅｄｂｙ ＰｓＡＰ２ｗａｓｈｉｇｈｌｙｃｏｎｓｅｒｖｅｄｉｎｐｌａｎｔａｗｉｔｈａｎｍａｘｉｍｕｍｉｄｅｎｔｉｔｙｕｐｔｏ７０％．ＴｈｅａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｎｃｏｄｅｄｂｙＰｓＡＰ２ｗｅｒｅｈｉｇｈ ｌｙｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｔｏｔｈｅＡＰＥＴＡＬＡ２ｇｅｎｅｓｏｆＰａｅｏｎｉａｌａｃｔｉｆｌｏｒａ，Ｖｉｔｉｓｖｉｎｉｆｅｒａ，ＴｈｅｏｂｒｏｍａｃａｃａｏａｎｄＰｏｐｕｌｕｓｔｏｍｅｎｔｏｓａｗｉｔｈ ｈｏｍｏｌｏｇｙｏｆ９７％，７２％，６８％ａｎｄ６３％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＧｅｎｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎａｌｙｓｉｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｇｅｎｏｍｉｃＤＮＡｏｆＰｓＡＰ２ ｃｏｄｉｎｇｓｅｑｕｅｎｃｅｗａｓ２４７７ｂｐ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ１０ｅｘｏｎｓａｎｄ９ｉｎｔｒｏｎｓ，ｗｈｉｃｈｗｅｒｅｏｂｅｙｔｏｔｈｅＧＴ－ＡＧｒｕｌｅ．Ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉ ｚａｔｉｏｎｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｔｈａｔＰｓＡＰ２ｗａｓｐｒｅｓｅｎｔｉｎｎｕｃｌｅａｒ，ｓｕｇｇｅｓｔｉｎｇｉｔｓｒｏｌｅａｓａｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ．ＴｈｅｉｓｏｌａｔｅｄＰｓＡＰ２ｇｅｎｅ ｗｉｌｌｌａｙａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｆｏｒｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｌｙａｎａｌｙｚｉｎｇａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｃａｎｄｉｄａｔｅｇｅｎｅｆｏｒｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｒｅｅｄｉｎｇｏｆｔｒｅｅｐｏｎｙ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＰａｅｏｎｉａｓｕｆｆｒｕｔｉｃｏｓａＡｎｄｒ；ｆｌｏｗｅｒｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ；ＡＰ２；ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ Ａｕｔｈｏｒ’ｓａｄｄｒｅｓｓ：ＳｈａｎｇｈａｉＢｏｔａｎｉｃａｌＧａｒｄｅｎ，Ｓｈａｎｇｈａｉ，２００２３１ 　　花发育及形态建成是植物生长发育过程中最为 中，Ａ类基因单独作用决定萼片的形成；Ａ类和Ｂ类 重要的事件之一。花型是花卉最为重要的观赏性状 基因共同作用形成花瓣；Ｂ类与Ｃ类基因共同作用决 之一，