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- 2017-05-14 发布于湖北
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生物样品的制备精选
第二章 生物样品的制备
;生物样品处理的主要问题:;生物样品预处理的基本原则:
步骤少、时间短,获得尽可能多的目标组分
通常包括以下考虑因素:
确定要处理的生物分子的目的和要求
掌握目标产物的物理、化学以及生物学性质
生物材料的破碎和预处理
分离纯化方案的选择和探索
评价生物分子纯度的检验方法
产物的浓缩、干燥和保存
;物理、化学及生物学性质的考虑:
1、水溶液和各种有机溶剂中的溶解性
2、不同温度、pH值和各种缓冲液中的稳定性
3、对温度、含水量和冻干时的稳定性
4、分子的大小、带电的情况、离心沉降的表现、在各种凝胶、树脂等填料中的扩散系数等
5、对各种蛋白酶、水解酶的稳定性和对各种化学试剂的稳定性等
6、对其他生物分子的特殊亲和力
7、组织及细胞内的定位分布等
;真核细胞的亚细胞器:(a)动物细胞;(b)植物细胞
;2.2 激光捕获显微切割技术
(laser-capture microdissection,LCM);A:大鼠子宫上皮H E-染色的冰冻切片样品
B:人空肠Cy2-Ab抗Cytokeratin上皮细胞冰冻切片样品
C:石腊包埋H E-染色的前列腺样品
D:人血液中Giemsa-染色的白细胞样品
E:大鼠小神经元细胞Nissl-染色的样品
F:小鼠HistoGene-染色的肾小球冰冻切片样品
;2.3 细胞的破碎
;细胞破碎方法;一、水溶液提取:
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