副结核分枝杆菌MAP0862蛋白的表达及在间接ELISA中的初步应用.pdfVIP

畜牧兽医学报 2016 ,47(4):789-795 Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica doi: 10. 1l843/j. issn. 0366-6964. 2016. 04. 019 副结核分枝杆菌 MAP0862 蛋白的表达及 在间接 ELISA 中的初步应用 张振l ， 2 ，冯宇1 ，张阁2 ，朱良全2 ，蒋卉2 ，丁家波2 链，赵鹏1 ，常维山h (1.山东农业大学动物科技学院，泰安 271018 ö2. 中国兽医药品监察所，北京 10008 1) 摘 要:本研究的目的是探索副结核分枝杆菌特异性蛋白 MAP0862 在牛副结核病血清学诊断中的作用，建立 牛副结核病特异性 ELISA 诊断方法。将通过原核表达获得的副结核特异性蛋白 MAP0862 纯化并定量后作为 包被抗原，经过一系列条件优化后初步建立了牛副结核病间接 ELISA 诊断方法。使用牛副结核阳性血清、牛布 病阳性血清、牛结核阳性血清、卡介苗免疫牛血清、牛大肠杆菌阳性血清以及健康阴性牛血清对该方法的验证表 明其具有良好的特异性。使用该方法对 300 份临床血清进行检测，结果表明该方法与 IDEXX 副结核检测试剂 盒的符合率为 94.3% 。基于副结核特异性蛋白质 MAP0862 建立的间接 ELISA 诊断方法能有效检测牛副结核 病。 M 关键词:牛副结核病ö AP0862 蛋白 öELISA 中图分类号:S855. 12 文献标志码:A 文章编号: 0366-6964(2016)04-0789-07 Expression of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis MAP0862 and Its Primary Application in Indirect ELISA 12 1 2 2 2 ZHANG Zhen . , FENG Yu , ZHANG Ge , ZHU Liang-quan , ]lANG Hui , 1 骨 DING Jia-bd* , ZHAO Peng , CHANG Wei-shan1 (1. College 01 Animal Science and Veterinary Medici肘， Shandong Agricultural University , Tai an 271018 , China; 2. China Institute 01 Veterinary Drug Control , Beijing 100081 , China) Abslract: The objective of the present study was to explore the effect of MAP0862 in sero-diagno sis of Bovine paratuberculosis , and establish a specific ELISA method based on MAP0862. The specific protein obtained by prokaryotic expression was used as coating antigen after purification and quantification ,an indirect ELISA was primary established after a seri