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苛养菌是指对营养要求苛刻，在普 通培养基上不生长或难以生长的一类 细菌；体外培养需添加特殊因子或其 他营养成分。 第一节 苛养菌 一、嗜血杆菌属 为一群无动力、无芽孢的G-细小杆菌；呈球杆状，有时呈丝状或多形态。属于巴斯德菌科,嗜血杆菌属。与临床有关的有9个：流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌、溶血嗜血杆菌、副溶血嗜血杆菌、杜克雷嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌、嗜沫嗜血杆菌、副嗜沫嗜血杆菌、迟缓嗜血杆菌。模式菌为流感嗜血杆菌。 （一）临床意义 本菌属存在于上呼吸道，定植可达人群 的50％。 1．流感嗜血杆菌 常引起鼻炎、咽炎、中耳炎、肺炎。在G-杆菌中引起肺炎者占到第三位。脑膜炎、心包炎、骨髓炎、关节炎也可分离到该菌。有荚膜b型对人致病性最强，脑膜炎病人中检出率最高，同时还可引起菌血症。其主要致病物质是内毒素、荚膜、菌毛和酶类。荚膜有杭吞噬作用，菌毛能粘附于人类口咽部细胞。致病力强的流感嗜血杆菌菌株具有lgA蛋白酶，能水解SIgA。 2. 副流感嗜血杆菌 引起人类咽炎及心内膜炎，是寄居健康人体上呼吸道细菌之一。 3．溶血嗜血杆菌 存在于人体的鼻咽部，常引起儿童上呼吸道感染； 4．埃及嗜血杆菌 有高度的传染性，易侵犯儿童。常存在于细胞内。 5．副嗜沫嗜血杆菌 属于正常菌群，引起心内膜炎、败血症、脑脓肿、脑膜炎。 6．杜克氏嗜血杆菌 为性传播病菌。常引起外阴脓疱、溃疡、淋巴结肿大。 1.为G-短小球杆菌，无芽孢、无鞭毛、有荚膜菌株，毒力较强。 2.需氧或兼性厌氧，最适生长温度为35℃，pH以7．6-7．8为最佳。培养时必须供给含有X、V因子的新鲜血液。最佳培养基是巧克力琼脂：因为加热可使V因子释放。 3.根据荚膜多糖抗原可分为6个血清型，其中b型的致病性最强，f型次之。 4.抵抗力弱，加热50℃30分钟被杀死。消毒剂敏感，干燥易死亡。DNA 的G+Cmol％为37—44。 (四)微生物检验 1．根据不同感染分别采取血液、脑脊液、鼻咽分泌物，采集后立即送检。 2．直接镜检 查到G-短小杆菌或多形态杆菌，结合临床症状，可做初步诊断。 3.分离培养 巧克力琼脂中加入抗生素(万古霉素、杆菌肽、氯林可霉素)，可提高本菌的阳性率。经18～24h培养出现小、无色透明的菌落。因为葡萄球菌能合成Ｖ因子释放，促进本菌的生长，故与金黄色葡萄球菌一起培养时，可见到靠近葡萄球菌的菌落较大，而远离的菌落较小，称为“卫星现象”。 4.抗原检测：可做荚膜肿胀试验,取抗体与菌悬液混匀，加美蓝混合后，室温10分钟用油镜观察，如菌体呈蓝色，周围绕有膨大空白圈为阳性。 5.核酸检测：即取囊性纤维化病人的痰，采用DNA杂交的方法，检查流感嗜血杆菌的外膜蛋白，比传统的培养方法阳性率高。 6.药物敏感试验 流感嗜血杆菌引起的感染性疾病，若β-内酰胺酶阴性，则首选氨苄青霉素、阿莫西林，次选磺胺及增效剂(TMP-SMZ)、二、三代头孢菌素、红霉素及氨曲南。应选用专用培养基(HTM)，检测β-内酰胺酶，如阳性提示对青霉素、氨苄西林和阿莫西林均耐药。b型与非b型相比，b型产生β-内酰胺酶比非b型高两倍。 二、鲍特菌属 (一)分类 包括百日咳鲍特菌、副百日咳鲍特菌、支气管鲍特菌、鸟鲍特菌、欣氏鲍特菌、霍氏鲍特菌，前三种DNA同源性高达72％～94％，DNA的G+C mol％为66～70，是临床常见的致病菌，而后三种临床致病报道较少。 (二)临床意义 百日咳的致病菌，人是惟一的传染源，通过飞沫传染。 感染后传染性强，患者出现阵发性剧烈咳嗽，直至咳出粘稠的痰液或呕吐为止。 病后及预防接种后可产生较持久的免疫力。 本菌粘附在气管和支气管上皮细胞上并迅速繁殖释放毒素：①百日咳毒素是主要毒力因子，与阵发性咳嗽、支气管痉挛有关。②丝状血细胞凝集素能促进病原菌粘附在纤毛上皮细胞上。③腺嘌呤环酶毒素可使吞噬活性受抑，导致免疫力减低。④气管细胞毒素对纤毛上皮细胞有特殊亲和力，抑制纤毛摆动并使细胞坏死脱落。 (三)微生物特性 该菌属为G-小杆菌，无芽胞，有荚膜。专性需氧，最适生长温度为35℃—37℃， O抗原为共同抗原，K抗原的因子7为百日咳、副百日咳和支气管炎鲍特菌所共有。经多次传代后，菌落变为粗糙而呈多形性；失去荚膜变为无毒株。 抵抗力弱，但在低温能生存，对紫外线敏感，日光照射60分钟可死亡。 （四）微生物检验 1．标本采集 ①咳碟法：患者对准打开的鲍-金氏培养基平板咳嗽数次，直接收集病人咳出的飞沫培养。②鼻咽拭子法：将拭子进入鼻咽部采集标本。 2．革兰染色直接镜检为G-小杆菌。