家蝇抗菌肽抗菌活性及抗菌机制的初步研究.pdfVIP

2·72 · 中国抗生素杂志2004 年 5 月第 29 卷第 5 期 文章编号:(2004) 家蝇抗菌肽抗菌活性及抗菌机制的初步研究 周义文　尹一兵　涂植光　陈辉　张雪梅　孟江平　朱旦 (重庆医科大学医学检验系, 　重庆 400016) 　　摘要: 　 目的　研究家蝇抗菌肽的抗菌活性及抗菌机制。方法　用损伤感染的方法诱导家蝇幼虫表达抗 菌肽, 通过 Sephadex 过滤层析和HL PC 技术纯化提取, 用平板法和稀释法作抗菌活性试验, 并用电子扫描技 术研究抗菌肽的抗菌机制。结果　家蝇抗菌肽对铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 ( ) 均有明显的抗菌活性。大肠埃希氏菌与 50 的纯化抗菌肽溶液一起37 ℃孵育60 后, 大肠埃 M R SA g m l m in 希氏菌不能存活。经电镜扫描观察发现, 细菌的细胞膜出现破损和穿孔现象。结论　家蝇抗菌肽具有明显的 广谱抗菌活性, 对阴性杆菌和阳性球菌均有杀伤作用。抗菌肽的抗菌机制是通过破坏细菌的细胞膜而杀伤细 菌的。 关键词: 　抗菌肽; 　抗菌活性; 　抗菌机制 中图分类号: R 917　　　文献标识码: A 　　抗生素的发现对病原菌感染性疾病的治疗产生了 1. 1. 1　菌株　铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、耐甲氧 革命性飞跃, 已成为人们对抗病原菌感染的强有力武 西林金黄色葡萄球菌( ) 均为临床标本分离株。 M R SA 器。但是, 近年来耐药菌株及多重耐药菌株的不断增 1. 1. 2　家蝇幼虫　以含有3% 奶粉的麦麸高压灭菌, 加, 临床抗感染治疗已陷入耐药菌危机之中。为应对耐 使相对湿度保持在 60%～ 70% , 饲料厚度约 5cm , 置 药菌感染, 人类在在不断研究和开发新型抗菌药物。近 入无菌卵, 35 ℃孵育, 幼虫( larvae) 生长致三期龄。 年来出现的抗菌肽就是一类具有巨大发展潜力的新型 1. 1. 3 　试剂和药物　 Sephadex G25、50 为瑞典 抗菌药物。抗菌肽(an tim icrob ial pep tides) 是生物免疫 Am ersham 公司产品; 氨苄青霉素由北京天坛生物制 系统产生的一类抵抗外界病原体感染的肽类生物活性 品厂生产, 批号 0311008。 物质, 广泛存在于昆虫、植物、动物及人体内。抗菌肽除 1. 1. 4　仪器　高效液相色谱仪( 1100 ) , A gilen t series 有非特异性地抗细菌、真菌、病毒等病原体外, 还有抗 德国; 扫描电子显微镜, 美国; D 37520 高速低温离心 肿瘤细胞的作用, 因此又称为肽抗生素( 机, 德国; 15 ×300