沼泽红假单胞菌砷(Ⅲ)S-腺苷甲基转移酶的初步晶体学分析.pdfVIP

第 35 卷第5 期 核技术 Vo l. 35 ,No.5 2012 年 5 月 NUCLEAR TECHNIQUES May 2012 沼泽红假单胞菌碑(III)S-腺音甲基转移酶 的初步晶体学分析 黄麟飞 1 ， 2* 郁峰1* 徐春艳 I 唐琳1 {I可建华 I 1 (中国科学院上海应用物理研究所 上海 201800) 2 (中国科学院研究生院北京 100049) 摘要 含石中化合物有高毒性， 直是全球性的公艾卫生难题。许多微生物能利用 S-皇育甲基转移酶(ArsM 酶) 催化有剧毒的无机 As(III)发生甲基化而解毒。为揭示酶促反应的真实机制，我们将来源于沼泽在[假单胞菌 (Rhodopseudanonas paluslris)的ArsM 酶(RpArsM)重组表达、纯化及结晶。在「海光源 BLI 7U1 线站收集蛋 白晶体衍射数据，初步晶体学分析表明， RpArsM 酶的晶体属于月1 21 21 空间群，晶胞参数分别是俨45.92 A, 0 b =66 .58 A, c=147.82 A，日书=户90 ，衍射分辨率达 2.oA。 关键词 沼泽红假单胞菌，呻(III)S-腺苦甲基转移酶(ArsM)，结晶 中图分类号 Q555 , 0722 化性甲基化反应和还原反应，期间伴随着一系列的 工农业生产和自然界的地球化学过程导致呻皮 单甲墓化、 J二甲基化和三甲基化的有机肺化合物的 含困化合物进入生物圈。合醉化学物质的f泛分布 生成，与实验观察结果相待。 Hayakawa 等[7J 则认为 及高毒性严重威胁人类的生存健康。 2011 年，美国 有毒物质和疾病登记局 (Agency for Toxic 终产物中的五价有机呻化合物系由无机三价肺化合 物经非酶促催化反应产生:而在酶促催化的氧化还 Substances and Dìsease Regis町， USA)将其列为有毒 物质的榜首[1] 目前，吹用水、食物、上壤以及雪 原过耗中，ArsM 酶催化复合物AS(GS)3 和MAS(GS)2 结合的 GSH 氧化成GSSG 形式， SAM 则被还原成 气的碎污染一直是困扰世界各国的公共卫生难题， 在发展中国家中尤甚。 S-腺昔高半肮氨酸(SAH)。 沼泽红假单胞菌是古老的原核光合细菌，广泛 生态环境中的畔主要以无机 As(III)和 As(V)的 用于环境治理(水质净化)及养殖业(饲料器加剂)等 形态存在，二者之间通过氧化-还原过程相互转化而 领域。根据文献[匀，以 RpArsM 酶作研究对象，用 保持动态平衡，其中 As(I1I)的毒性更大。微生物耐 解析其晶体结构来揭示 ArsM 酶催化甲墓转移的真 代谢研究表明，微生物的叫代谢有三条主要途径， 即氧化代谢、还原代谢及甲墓化代谢途径[2] ，后者 实机制。本文报道该