猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用.pdfVIP

生物彼术 120 • 中间畜牧兽阪 2011 年第 38 卷第 3 期 猪圆环病毒 2 型间接 ELISA 抗体检测 试剂盒的研制及初步应用 胡小华，李刚，史利军，张坤，贾凤芹 (中国农业科学院~~京畜牧兽医研究所，北京 100193) 摘要:以大肠杆自尊原核表达系统表达的猪肉环病毒 2 型 Cap 蛋白为抗原，建立猪阴环病毒 2 硝间接 ELlSA 检视1J 方法，优 化 ELISA 段成条件，研制猪阅环病毒 2 骂自凹JSA 抗体检测试剂愈。与商MI 化试拥l 意相比，该检测试剂愈敏感性、特异性和符 合率分别为 95.12% 、 92.86% 相 94.55% ;同时与猪剧环病毒 1 型 (PCVl )、猪樵病毒 (CSFV) 、猪繁殉与呼吸综合怔病毒 (PRRSV)等多种病毒阳性血清兀交叉反应。试剂盒具街较好的重复饨，在一20 C 至少可保#1 年以上，将其应用于临床血 清样品的检测，结果安徽、广东、J两采样猪场的 PCV2 阳性率分别为 100% 、 48.39% 、 100% 。 关键词:猪剧环病毒 2 型;Cap 蛋白:间接凹JSA;抗体检测试:iftJ 愈 中图分类号:S854.4 文献标识码:A 文章编号:1671-7236(2011)03-0120翩04 猪困环病毒(porcine circovírus , PCV) 感染是 已成为阻碍巧今养猪业发展的敢要病原之…。 由猪阿环病毒 2 型 (porcine circovirus serotype 2 , 1 材料与方法 PCVZ) 引起的猪的一种传染病，与断奶仔猪多系统 1. 1 材料 66 份临床猪血清样本分别来自安徽、 亵崎综合征 (postweaning multisystemic wasting 广东、广阴猪场，其中安徽 25 份，广东 31 份，广西 syndrome , PMWS) (Tim 等， 2009; Clark , 1997) 、猪 10 份。 PCV21在组 Cap 纯化蛋白(679.34μg/mL) 、 呼吸道疾病综合征 (porcine respiratory disease 猪圆环病毒 2 型标准阴阳性血清、猪困环病毒 1 f四 complex. PRDC) (Allan 等，2000;Kim 等， 2003) 、猪 (PCVl)、猪瘟病毒 (CSFV) 、猪繁殖与呼哑综合征 皮炎与肾病综合征 (porcine dermatitis and ne- 病毒(PRRSV) ，猪细小病毒(PPV) 、猪伪狂犬病病 phropathy syndrome , PDNS) (Allan 等， 2000; Mee- 毒(PRV) 由中回农业科学院北京畜牧鹊院研究所 han 等， 200 1)、繁殉障碍 CKim 等， 2004; West 络， 动物医学宽保存;辣根过氧化物酶(HRP) 标ìè筒萄 1999) 等多种疾病有关，并且 PCV2 感染町以造成免 球菌 A 蛋白(SPA) 购自武仅某公叫;BCA 蛋白商量 疫抑制，寻|鹉其他各种病原的继发感染，加3震发病 试开IJ 盘购向北京某生物科技有限公司;丁MB 粉剂、 程度。 牛血清白蛋白CBSA) 购自 Sigma; 96 孔可拆式酶标 虽然 20 世纪 70 年代丁ischer 等(974) 就发现 板购自:lt 京某科技有限公司;小牛陆l 清购向天搏某 了猪圆环病毒