猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒双重RT-PCR方法的建立和初步应用.pdfVIP

中同畜牧兽医 2011 年第 38 带第 6 期 • 94 • 生物技术 猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒双重 RT-PCR 方法 的建立和初步应用 陈静l ，张小飞1 ，范虹锚2 ，黄显明2 O. 南京天邦生物科技有限公司，杭苏南京 211102; 2. 南京农业大学动物科技学院，江亦南京 210095) 摘要:根据 GenBank 上已发表的猪瘾病毒(CSFV) 和牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 的全慕的序列，进行对比分析，分别设计 合成两1才能特异性扩增 CSFV、 BVDV 的引物。经过条件优化后，建立了检测 CSFV 租 BVOV 的双重 RT-PCR 方法，扩增两 种病毒的片段，大小分别为 938 、 650 忡。 ril 用该方法对 11 批牛率丸细胞、7 批胎牛血清、60 个批次的猪瘟细胞茵、10 份全JÍIl. 样及 10 份组织样进行检测。通过试验证明，所建立的方法具有良好的特异性和敏感性，为防止猪癌细胞醋的污染及进行 CS- FV 和 BVDV 鉴别诊断提供了有效方法。 关键词:CSFV;BVDV;R丁ωPCR;检测 申图分类号:S858.28 文献标识码:A 文章编号: 1671-7236(201 1)06-0094-04 猪瘟(classical swine fever ,CSF) 是由猪痛病毒 员，BVDV 不仅可以感染牛，还可以感染猪，引起的 临床症状和病理变化与猪撒相似CPaton 等， 1994) 。 (CSFV)引起的一种高度接触性烈性传染病。猪不 BVDV 与 CSFV 的核背酸阀、师、性约为 60% ，氨基酸 分年龄、性别和品种均易感染，…年四季均可发生。 同源性约为 85% (谢西锋等， 2001) ，在血清学上存 中间每年四猪瘟造成的经济损失达数十亿，目前针 在交叉反应(Thiel 等， 1991) ，因而血清学方法难以 肘猪癌的主要治疗措施是疫商免疫接种。 牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea vi- 区分，用常规的病原检测方法难以对 BVDV 和 CS­ rus ， BVDV) 与 CSFV 均属黄病毒科、瘟病毒隔成 FV 进行鉴别检测和惨断。 精瘟细胞荫的生产需要牛身患丸细胞(N日丁川和 收摘自期:2010-11-17 胎牛血请来繁殖猪瘟病毒，如果 NTBE 或胎牛血清 作者简介:陈静0982一)，女，江苏人，硕士生，研究方向 z 兽医微 中含有 BVDV，则有可能将日VDV 这种外源病毒带 生物与免疫学。 人猪癌细胞苗中，造成猪癌细胞萌的市染。另外 通倍作者:张小飞.J想，研究员，硕士生导师。 E-mail: xiaofei0804 @ 用含BVDV抗体的胎牛血清t