人类疾病动物模型概述2016级研究生,2016年9月.ppt

FEMALE MALE +/+ -/- +/+ -/- 3. HSF1基因敲除 Xiao XZ, et al. EMBO J, 18(21): 5943-52.1999 条件性基因敲除（conditional gene knockout) 条件性基因敲除主要通过Cre/loxP或者Ftp/FRT重组系统来实现。 Cre/loxP系统 Cre/loxP系统来源于F1噬菌体，可以介导位点特异的DNA重组。该系统含有两种成分：①一段长34bp的DNA序列，含有两个13 bp的反向重复序列和一个8 bp的核心序列，称为loxP位点；②Cre重组酶，它是一种由343个氨基酸组成的单体蛋白，可以引发loxP位点的DNA重组。当一段DNA序列位于两个loxP位点之间的时候，在Cre重组酶的作用下，这段序列可被删除(当两个loxP位点的方向相同)，或者方向发生倒转(当两个loxP位点的方向相反)。 利用Cre/loxP系统进行条件性基因敲除，需要两只转基因小鼠。第一只小鼠通过同源重组技术将loxP位点分别置于目的基因的两端；第二只是转基因小鼠，将Cre重组酶置于某特定基因启动子的调控之下，可以使其在某特定组织或诱导物存在的条件下表达。最后，让这两只小鼠进行交配，所产生