2017届一轮复习细胞工程.ppt

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2017届一轮复习细胞工程

* 细胞工程 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体的制备 核移植 植物细胞工程 动物细胞工程 理论基础 细胞的全能性 其他动物细胞技术的基础 一、植物细胞工程的基本技术 (一)细胞的全能性 1、概念:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。 2、原因:受精卵 有丝分裂 体细胞 含全套遗传基因 3、全能性的程度 (1)受精卵的全能性最高 受精卵 生殖细胞 体细胞 > > (2) 植物细胞>动物细胞 (3) 4、形成不同组织、器官原因: 基因选择性表达 5、条件: (1)离体状态 (2)提供营养物质、激素 (4)体细胞:分化程度低的﹥分化程度高的     分裂能力强的﹥分裂能力弱的 (二)植物组织培养技术(重点 理解 ) 1、原理:植物细胞的全能性 2、过程: 外植体 愈伤组织 根、芽 植物体 再分化 脱分化 避光 需光 植物激素: 细胞分裂素、生长素 分化培养基 人工种子:胚状体、不定芽、顶芽和腋芽经人工薄膜包装而得。 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B 正在融合的原生质体 去细胞壁 再生细胞壁 植物组织培养 植物细胞融合 植物体细胞杂交过程 4、优势:(与有性杂交方法比较) 克服植物远缘杂交不亲和性 2、原理: 细胞膜的流动性和细胞全能性 (三)植物体细胞杂交 3、原理: 物理方法——离心、振动、电激 化学方法——聚乙二醇(PEG) 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 二、动物细胞培养 1、过程 不易传下去 增殖逐渐缓慢以致停止 细胞的核型发生变化 使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。 常见现象:细胞贴壁、接触抑制 (1)无菌、无毒的环境 (2)营养 (3)温度和PH (4)气体环境: (添加一定量的抗生素,定期更换培养液) 补充合成培养基中缺乏的物质 36.5 +0.5度 ;PH为7.2-7.4。 O2作用:进行 呼吸,提供能量 CO2作用:维持培养液的PH值 (葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。) 有氧 95%空气和5% CO2 二、动物细胞培养 2、条件 比较: 培养基特有成分 培养基性质 原理 比较项目 细胞的全能性 蔗糖、植物激素 固体培养基 植物组织培养 葡萄糖、动物血清 液体培养基 细胞增殖 动物细胞培养 1、原理: 三、动物细胞核移植 2、分类: 动物细胞核的全能性 胚胎细胞核移植、体细胞核移植 供体细胞(供核) 细胞培养 体细胞 卵母细胞 (减Ⅱ中期:供质) 去核 无核卵母细胞 核移植 重组细胞 重组胚胎 胚胎移植 代孕母体 新个体 分娩 激活 3、过程: 完成细胞分裂和发育进程 含有促使体细胞细胞核表现全能性的物质和营养 四、动物细胞融合 1、原理: 细胞膜的流动性 物理法: 化学法: 生物法: 灭活的病毒(与植物细胞杂交不同点) 离心、振动、电刺激; 聚乙二醇; 2、诱导融合的方法: 细胞A 细胞B 杂交细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 仙台病毒等 3、过程: 四、动物细胞融合 *

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