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实验九 真菌
实验九 真 菌 目的要求 掌握白假丝酵母菌和新生隐球菌的染色性、菌落特点和鉴定实验。 器材和试剂 菌种:白假丝酵母菌、新生隐球菌 培养基:沙氏培养基、血平板、多细胞真菌 试剂:革兰染液,小牛血清 其他:盖玻片,载玻片,小试管等。 步骤与方法 菌落观察 : 1.白假丝酵母菌接种于沙氏平板和血平板上,室温培养后菌落为类酵母型,表面光滑湿润,边缘整齐,灰白色或奶酪色。 2.新生隐球菌在沙氏平板和血平板上,室温或35度培养后菌落为酵母型,表面粘稠,混浊,由乳白色渐转为橘黄色、棕色或深棕色。 镜下观察: 1.白假丝酵母菌革兰染色阳性,着色不均。芽生孢子为圆形或椭圆形,有时可伸长成芽管,不与母细胞脱离形成假菌丝。 2. 新生隐球菌革兰染色阳性,菌体圆形或椭圆形,可有圆形芽管。墨汁染色,暗背景下,菌体为圆形或椭圆形,可有圆形芽管,细胞外有一层宽厚的透明荚膜。 步骤与方法 鉴定实验 芽管形成实验:用于区别白假丝酵母菌和热带假丝酵母菌。 操作:将假丝酵母菌接种于0.2-0.5ml的人或动物血清中,35摄氏度1.5-4h,镜下观察有无芽管形成。 结果:白假丝酵母菌为阳性,热带念珠菌阴性。 新生隐球菌 墨汁负染色法 制片:取1滴优质墨汁置于载玻片上与被检材料混合,盖上盖玻片于显微镜下观察。 显微镜检查:新生隐球菌为圆形或卵圆形酵母细胞,有芽生孢子,细胞外有一层胶质样荚膜,一般厚度与菌体相等。菌体和荚膜不着色,透亮,背景为黑色。 新生隐球菌墨汁负染 多细胞真菌 1.观察多细胞真菌在沙氏培养基上的菌落特点。 曲霉 毛霉 青霉 多细胞真菌 2.高倍镜下观察多细胞真菌的孢子和菌丝。 3.观察多细胞真菌的示教片。
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