Chapter6_酶、细胞、原生质体固定化.pptVIP

第六章酶、细胞、原生质体固定化 Immobilized Enzyme, Cell, and Protoplast Contents 2.6生物反应器的选择 固定化细胞系统的生产能力和在工业上应用的可行性, 在很大程度上取决于反应器的选择, 按其用途可以分为2 类: ①生物转化反应器, 其产物的生成与细胞生长无关的生物反应器; ②生产初级产物的反应器。 影响反应器选择的因素有固定化方法、固定化细胞的形状、颗粒大小、密度、机械强度、底物的性质、抑制作用、流体动力学的特性以及经济因素等。 目前供选择的反应器： ( 1) 连续搅拌罐反应器, 适用于有底物抑制的情况。 ( 2) 填充床反应器, 又称活塞流反应器, 对产物抑制时有很好效果, 适合滞留时间较长的反应。 ( 3) 流化床反应器, 可用于处理黏性强和带颗粒的底物, 也可以用于需要供氧或排放气体的反应。 ( 4) 膜反应器, 适于需要供氧或排出CO2 的反应, 但对细胞生长速度快、细胞浓度高、易引起膜破裂的不宜用MR。 ( 5) 转盘式生物反应器, 其优点是易于供应氧气、细胞浓度高、发酵液黏度低、所需能量低和操作成本低。 此外还有塔式反应器、纤维固定细胞反应器、筛板反应器和循环床反应器等, 但迄今为止还没有一种通用的、理想的反应器, 因此必须针对各自研究或生产的对象, 选用或研制合适的生物反应器。 由于膜固定化细胞反应器能把高密度细胞固定在膜所形成的空间内, 细胞处于自由环境中, 免受剪切力损伤, 同时还可对产物进行原位分离, 消除了抑制效应, 便于大规模连续生产, 因而使生产率大大提高, 已成功地应用于微生物发酵和动植物细胞大规模培养中。 目前, 固定化细胞生物反应器在发酵工业、食品工业、能源、医药和环境工程上都具有了一定程度的应用, 并且部分研究成果已经完成中试阶段, 开始了工业化生产。 2.7固定化细胞的应用 食品工业中的应用 发酵工业中的应用 三废处理中的应用 固定化细胞在食品工业中的应用 在食品工业中,部分反应需要多酶同时作用,因此传统的酶法或者固定化酶法生产存在一定局限性,尤其是动植物细胞生长缓慢,生长过程不稳定。固定化细胞技术使上述问题迎刃而解。 人们利用固定化细胞技术连续发酵生产酸牛奶的方法,与传统的间歇生产工艺相比,具有简化菌种制备过程、乳酸菌种和发酵酸化设备利用率高、控制简单等优点。 植物细胞培养的难度高,生长缓慢,因此, 有人利用固定化Capsicum frutescens 和Mill.Cv.annuum 细胞培养物生产辣椒素。与游离的悬浮细胞相比,辣椒素产量提高了数倍。还有研究者在研究固定化Capsisum annuum 细胞生产辣椒素时,在培养基中添加凝胶多糖和黄原胶等物质来诱发辣椒素的生产,也取得了很好的效果。与之类似,咖啡因是可乐饮料中重要的添加剂, Furuya 等人报道利用聚氨酯泡沫固定化Coffea arabica 细胞长期连续生产咖啡因。 固定化细胞在发酵工业中的应用 固定化细胞技术作为一种高效的生物发酵工艺,潜力巨大。中国科学院沈阳生态所通过将细胞过程、发酵工程及固定化细胞技术巧妙地结合应用,开发了固定化细胞酒精发酵技术。采用装有固定化细胞的柱式连续反应器,以提高反应速度。将每天接种改为一次性接种,发酵周期从72 h缩短为30 h ,酒精生产能力提高1 倍以上。这对缓解我国能源紧张意义深远。 Bertkau 等人用吸附在碎硅粒上的Schizosaccharomyces pombe 将苹果酸转化为乳酸,反应器中葡萄酒苹果酸48 h后消失,不仅酸度减少,同时增加了芳香的醇味。 Ciani 等人报道了一种利用固定化的Candida stellata 提高葡萄酒中甘油含量的方法, 并证实利用固定化的C. stellata 与酿酒酵母联合使用可以改善葡萄酒的风味,提高其质量。 固定化细胞在三废处理中的应用 固定化细胞在三废处理中具有反应速度快、运行成本低等优点。 Geoffrey 等人 将小球藻固定在藻朊酸盐中,用来聚集Co 、Zn、Mn 等金属,在5 h内62 %的Co 、40 %的Mn、54 %的Zn 被吸附;而在相同条件下,悬浮细胞的吸附量要小得多。 Shreve 等人利用固定化假单胞菌降解甲苯,与游离细胞相比,固定化细胞体系的半饱和常数增加了30倍,细胞的最大比生长速率降低了2 倍。 Anselmo等人用琼脂、海藻酸钙、卡拉胶和聚乙烯酰胺等载体包埋固定化微生物降解苯酚；又以聚氨酯泡沫为载体固定镰刀菌Fusarium sp . 菌丝体,在完全混合器中降解酚。 周定等人对固定化细胞处理含酚废水进行了研究,利用海藻酸钙包埋热带假丝酵母( Candi