专题2目的蛋白的获得及其功能研究.pptVIP

本课程以专题形式开设，分为6个专题 1.目的基因的获得及其功能研究 2.目的蛋白的获得及其功能研究 3.核酸相互作用研究 4.核酸与蛋白质相互作用研究 5.蛋白质相互作用研究 6.小分子物质与生物大分子的相互 作用研究 一、目的蛋白的获取和纯化 二、从基因到蛋白相关的检测分析技术 （一）（二） 三、蛋白组学研究内容及方法 一、目的蛋白的获取和纯化 天然蛋白 重组蛋白 蛋白质分离纯化的一般步骤和原则 蛋白样品的制备 常用的蛋白分离技术 重组蛋白纯化需要注意的一些问题 天然蛋白 1.已知蛋白（得到已明确功能的蛋白） （特定活性跟踪，亲和层析，N端测序，结构分析，结构改造） 2.未知蛋白（带有某种功能的蛋白） （活性跟踪法,从cDNA文库中获取 基因重组重组蛋白 目标蛋白） 重组蛋白 自20世纪70年代中期首例cDNA克隆问世以来，构建cDNA文库已成为研究功能基因组学的基本手段之一。由于cDNA不像基因组DNA含有内含子而难于表达，因此可以从cDNA文库中筛选到所需的目的基因，并直接用于该目的基因的表达。 通过构建cDNA表达文库 可以提供构建分子标记连锁图谱的所用探针； 可以用于分离全长基因进而开展基因功能研究 而