实验一 水质的微生物检测.pptVIP

需氧革兰阳性杆菌检测 南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心 教学对象：高等医学院校卫生检验专业学生 实验课时：4学时 课程类型：专业实验课 课程要求：必修 每组人数：2人 实验目的 掌握棒状杆菌属的形态特性、染色方法、培养特性及菌落特点 熟悉蜡样芽胞杆菌形态染色、菌落特点、常用生化反应及鉴定试验 实验器材 显微镜 恒温培养箱 超净工作台 一、白喉棒状杆菌的鉴定 形态观察 方法：革兰染色 结果：菌体细长、微弯，一端或两端膨大成棒状，细菌呈V、L等字母形或栅栏状排列。革兰染色阳性 一、白喉棒状杆菌的鉴定 形态观察 Albert染色法： 制片，在涂片上滴甲液5min后水洗，用乙液1min后水洗，干后镜检。 结果：可见白喉棒状杆菌菌体呈草绿色、异染颗粒呈紫色。异染颗粒较菌体粗大，位于菌体的一端或两端，也有的在菌体中央。 一、白喉棒状杆菌的鉴定 培养物观察 血平板： 灰白色不透明的菌落，直径1mm左右，有的有狭窄的溶血环 亚碲酸钾琼脂平板： 直径1mm左右、圆形、凸起、光滑、湿润、呈黑色或灰黑色。 吕氏血清斜面： 可见生长丰富，形成细小、灰白色、有光泽的菌落 一、白喉棒状杆菌的鉴定 二、蜡样芽胞杆菌的鉴定 形态观察 方法：革兰染色 结果：可见两端钝圆、链杆状排列的革兰阳性粗大杆菌，无荚膜，培养6小时后可形成小于菌体的圆形芽胞，位于菌体中央或次极端 二、蜡样芽胞杆菌的鉴定 培养物观察 普通琼脂平板 圆形、凸起、乳白色浑浊、边缘不整齐的大菌落，形成的菌落沿划线道蔓延扩展，呈片状生长，对光观察似白蜡状。血平板：菌落周围有β溶血环。 二、蜡样芽胞杆菌的鉴定 乳光反应 原理： 蜡样芽胞杆菌能产生卵磷脂酶，能迅速分解卵磷脂，生成甘油酯和水溶性的磷脂胆碱，故在菌落周围出现乳白色浑浊环 方法： 用接种针挑取可疑菌落点种在10%卵黄琼脂平板上，35℃培养3h~6h 结果： 3h后无菌落生长，但在点种处出现浑浊环；6h后浑浊直径可扩大至5~6mm 意义： 用于测定细菌是否产生卵磷脂酶，也可以计数菌落。 注意事项 注意无菌操作 Albert染色时掌握两种染液染色的时间。 乳光反应的接种方法为点种，不是划线接种。 总目录 上页 退出 下页 返回 退出 总目录 下页 退出 Albert染色 在亚碲酸钾血琼脂平板上的白喉棒状杆菌菌落（18～24 h）