第十九章革兰氏阴性需样氧杆菌.pptVIP

第十九章 革兰氏阴性 需氧杆菌 岳 华 布氏杆菌属 (Brucella) 布氏杆菌又名布鲁菌，是多种动物和人布氏杆菌病 (brucellmis)的病原，不仅危害畜牧生产，而且严重损害人类健康，因此在医学或兽医学领域都极为重视。 形态及染色特性 细菌呈球形、球杆形或短杆形，新分离者趋向球形。0.5～0.7um×0.6～1.5um，多单在，很少成双、短链或小堆状。不形成芽孢和荚膜，偶尔有类似荚膜样结构，无鞭毛不运动。革兰氏染色阴性，姬姆萨氏染色呈紫色。经柯兹罗夫斯基或改良ZiehlNeelsen、改良Koster等鉴别染色法染成红色，可与其他细菌相区别。DNA的G+Cmol%为为55～58。 培养及生化特性 此属细菌专性需氧，但许多菌株，尤其是在初代分离培养时尚需5%～10%CO2。最适生长温度37℃，最适pH为6.6～7.4。 种和生物型 该属现包括6个种20个生物型，即马尔他布氏杆菌生物型1～3、流产布氏杆菌生物型1～9、猪布氏杆菌生物型1～5、绵羊布氏杆菌、沙林鼠布氏杆菌和犬布氏杆菌。 抗原性 布氏杆菌抗原结构非常复杂，目前可分为属内抗原与属外抗原，前者包括A、M及R抗原等表面抗原。 属内抗原 A抗原与M抗原 其抗原决定簇位于细胞壁的脂多糖蛋白复合物上，为外露的多糖链部分。 R抗原 为细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物。 抵抗力 本菌对外界环境的抵抗力较强，在污染的土壤和水中可存活1～4个月，皮毛上2～4个月，鲜乳中8d，乳、肉食品中约2个月，粪便中120d，流产胎儿中至少75d，子宫渗出物中200d。在直射阳光下可存活4h。 对湿热的抵抗力不强，60℃加热30min或70℃5min即杀死，煮沸立即死亡。 对消毒剂的抵抗力也不强，2%石炭酸、来苏儿、烧碱溶液或0.1%的升汞，可于lh内杀死本菌;5%新鲜石灰乳Zh或1%～2%福尔马林3h可将其杀死;0·5%洗必泰或0·01%度米芬、消毒净或新洁尔灭，Smin内即可杀死本菌。在pH5或更低情况下迅速死亡。 致病性 本菌不产生外毒素，但有毒性较强的内毒素。 本属细菌可感染的动物种类极多，目前查知者已有60多种，包括各种家畜、野生哺乳动物、啮齿动物、鸟类、爬虫类、两栖类和鱼类。 布氏杆菌可引起豚鼠、小鼠和家兔等实验动物感染，豚鼠最为易感。 微生物学诊断 布氏杆菌病常表现为慢性或隐性感染，其诊断和检疫主要依靠血清学检查及变态反应检查。细菌学检查仅用于发生流产的动物和其他特殊情况。 1·细菌学检查 病料最好用流产胎儿的胃内容物、肺、肝和脾以及流产胎盘和羊水等。也可采用阴道分泌物、乳汁、血液、精液、尿液以及急宰病畜的子宫、乳房、精囊、睾丸、附睾、淋巴结、骨髓和其他有局部病变的器官。 显微镜检查 病料直接涂片，作革兰氏和柯兹洛夫斯基染色镜检。若发现革兰氏阴性、鉴别染色为红色的球状杆菌或短小杆菌，即可作出初步的疑似诊断。此法更适合于作流产材料及流产数日月内的阴道分泌物检查。 2·血清学检查 有多种检查方法，归纳起来不外乎血清中布氏杆菌抗体检查和病料中布氏杆菌检查两类方法。 用已知抗体可检查病料中是否存在布氏杆菌，或分离培养物是否为布氏杆菌，比细菌学检查法简便快速，因而具有较大实用价值。常用方法有荧光抗体技术、反向间接血凝试验、间接炭凝集试验以及免疫酶组化法染色等。 动物在感染布氏杆菌7～15d可出现抗体，检测血清中的抗体是布氏杆菌病诊断和检疫的主要手段。方法多，各有所长，目前还没有一种完美的方法。因此在实际工作中，最好用一种以上的方法相互配合。 在大规模检疫时可采用准确性较差、操作较简便的方法进行普遍筛选 (初筛试验)，然后再用准确性较高、但操作复杂的方法予以复核 (确定试验)。国内常用玻板凝集试验、虎红平板凝集试验、乳汁环状试验进行现场或牧区大群检疫，以试管凝集试验和补体结合试验进行实验室最后确诊。 3·变态反应检查 皮肤变态反应一般在感染后的20～25d出现，因此不宜作早期诊断。本法适于动物的大群检疫，主要用于绵羊和山羊，其次为猪。 凝集反应、补体结合反应和变态反应出现的时间各有特点。即动物感染布氏杆菌后，首先出现凝集反应，消失较早;其次出现补体结合反应，消失较晚；最后出现变态反应，保持时间也较长。在感染初期阶段，凝集反应常为阳性，补体结合反应或为阳性或为阴性，变态反应则为阴性。到晚期慢性或恢复阶段，则凝集反应与补体结合反应均转为阴性，仅变态反应呈现阳性。因此有人主张，为了彻底消除各类病畜，应同时使用三种方法进行综合诊断。 免疫防治 菌苗接种虽有显著效果，但欲根除此病，则尚须严格执行畜群全面检疫及淘汰病畜的措施。已有的菌苗种类