分子生物学郑敏.pptVIP

RNA的剪接（RNA splicing ） RNA剪接（RNA splicing）：从DNA模板链转录出的最初转录产物中除去内含子，并将外显子连接起来形成一个连续的RNA分子的过程。  内含子的删除机理 （1）GU-AG型内含子 5` splice site含：GU 3` splice site含：AG GU-AG（最初称GT-AG） 规则：描述了在前体mRNA中内含子的最初及最末位置上必须出现的恒定的双碱基 核内RNA完成剪接所需的只是5`位点、3`位点和分支位点（branch site) 的三个短的一致性序列。 分支位点位于内含子3`剪接位点18~50个核苷酸处。 snRNA是GU-AG型内含子剪接所必需的 参与剪接过程的5个snRNP是U1，U2，U4，U5和U6。 每个snRNP含一个snRNA 和几种蛋白质。 snRNP和其他一些辅助蛋白共同构成剪接体。 （2）GC-AG型和AU-AC型内含子 人类基因组剪接位点： GU-AG＞98% GC-AG＜ 1% AU-AC≈0.1% 注意：这几种内含子在很多基因组内同时存在，有时甚至出现在同一条基因里。 （3）I 类内含子和 II类内含子 I 类和II类内含子具自我切割能力。 自我剪接（self-splicing, autosplicing)： 像催化作用一样，内含子能从RNA里切下自已，而这只依赖于内含子中的RNA序列。 Note: I类内含子比II类内含子更普遍，两类之间几乎无联系。但这两类RNA在体外都能自我剪接，而不需其它蛋白质提供酶活性。但在体内需蛋白质帮助折叠。 * * 断裂基因(interrupted gene):对可表达为蛋白质的基因，如其初始转录产物与成熟mRNA相比，其间含不能编码为蛋白质的间隔序列，则这个基因称断裂基因。包括内含子（intron）和外显子（exon）。 生物体内内含子的种类 细胞器，细菌 II 类 细胞核 tRNA前体中的内含子 细胞器 双内含子 细胞器，细菌，低等真核生物细胞核中 I 类 细胞核 GU-AG,GC-AG,AU-AC 细胞内定位 内含子类型 （1）GU-AG型内含子 （2）GC-AG型和AU-AC型内含子 （3）I 类内含子和 II类内含子 Intron-exon boudaries have short consensus sequences in the intron Correct splicing removes 3 introns by pairwise recognition of the junctions 原始转录产物 自由鸟苷酸的3`-OH作亲核基团攻击内含子5`端的磷酸二酯键，从上游切开RNA链 RNA剪接中间产物 上游外显子的自由3`-OH作为亲核基团攻击内含子3`位核苷酸上的磷酸二酯键，使内含子被完全切开 完成剪接的RNA II类内含子的自我剪接过程 原始转录产物 内含子本身的某个腺苷酸的2`-OH作为亲核基因攻击内含子5`端的磷酸二酯键 2`,5`－磷酸二酯键 RNA剪接产物 与3`末端相连 上游外显子的3`-OH作亲核基团攻击内子3`位核苷酸上的磷酸二酯键,使套索结构完全解离 套索结构中的腺苷酸带有3个磷酸二酯键 完成剪接的RNA 内含子