汞镉对游离和固定化脲酶活性的影响.pdf

第 40卷 第 6期 土 壤 学 报 Vo1．40．No．6 2003年 11月 ACTA PEDOLOGICA SINICA NOV．，2003 汞镉对游离和 固定化脲酶活性的影响* 和文祥 陈会明 朱铭莪 (西北农 林科技 大学资环学 院 ，陕西杨陵 712100) 摘 要 通过对脲酶与汞镉 间关系的研究 ，结果表 明：不同状态 (溶液态 、粘粒态和土壤态)脲酶对 汞 、镉的反应表现 出类似 的规律性变化 ，即汞 、镉抑制脲 酶活性 ，其 中汞镉复合污染 的影 响幅度最大 ，汞的 生态毒性最强 ；相关分析显示脲酶活性均可表征样 品汞 、汞镉污染 的程度 ；在汞 、镉共存条件下 ，脲酶活性 不仅受到汞 、镉单 因素 ，而且受到它们 间交互作用的影 响 ，但仍 以单独抑制为主 ；由于不 同状态脲酶载体的 差别 ，导致受影 响幅度有较大差异 ，其主要取决于载体对脲酶保护作用和重金属缓 冲作用 的大小 ，溶液态 脲酶无载体 ，而粘粒态和土壤态则相反 ，故溶液态脲酶更 易受到重金属的破坏 ，酶的反应也较敏感 。温度 和尿素浓度均增强 了汞镉的抑制作用 。 关键 词 脲酶 ，存 在状态 ，重金 属 中图分类号 S154．2 重金属…作为土壤 的两大污染之一 ，会通过工业三废 、肥料等进入环境 。尽管排放量小于有机物 ， 属于点源污染物 ，但 由于其难 降解性和难移动性 ，对土壤 、水体等生态系统的破坏仍十分严重 ，特别是汞 和镉 [，它们 的污染面积 已分别达到 3．2万 hm 和 1．3万 hm 。尤其令人担忧 的是其可通过食物链 降低 农产 品质量 、危害人畜健康 ，故对其转化 、毒性监测及生态毒理 的研究一直是土壤 、环境等学科的重要课 题之一 。近 3O年来 国内外学者_3 将土壤酶引入到重金属污染研究领域 ，先后提 出脲酶、过氧化氢酶、 转化酶等污染监测指标 ，但结果随土壤类型、pH、重金属种类等不 同而有所差异 ，这主要是土壤 中成分 复杂、影响因素繁多 ，造成土壤酶存在状态等差别所致 。此方面也鲜见报道 。为此本文 以脲酶为材料 ， 以单一和复合汞 、镉污染为处理 ，研究了酶活性随汞镉 浓度增加 的变化规律 ，探讨酶存在状态对二者关 系 的影响 ，最终为农业可持续发展和环境保护等提供重要依据 。 1 材料与方法 1．1 供试 材料 溶液态脲酶 ：洋刀豆脲酶 (Jackbeanllrease)购 自英 国 BDH化学有 限公司 ，活力 1．7Eu。使用前将 0．500g洋刀豆脲酶溶于 2000mlpH7．5的 s—HCI缓冲液 中即可 。 土壤态脲酶 ：土样采 自西北农林 科技大学试验地 。采样 时先去 除 O～5cm表土 ，五 点法 收集 5～ 2Ocm土样 ，风干后过 lmm尼龙筛 ，备用 。常规方法_7’测 定土壤基本性质 ：粘粒 125、9gkg一，有机质 l7．65gkg一，全氮 1．502gkg一 ，全磷 1．625gkg ，碱解氮 137．592mgkg。。，速效磷 345．52mgkg一 ；土壤 重金属含量 № 0．074mgkg (硫酸一高锰酸钾法消化 ，冷原子荧光测 汞仪测定)，cd0．348mgkg一 ，cr 62．5mgkg一，Pb22．30mgkgI1(浓盐酸一浓硝酸一高氯酸消化 ，原子分光光度计法)。 粘粒态脲酶：沉降法l9提取本试验土样 中 0．001mm粘粒 ，S0~C烘 干，按 比例加入溶液态脲 酶溶 液 ，在恒温摇床上振荡让其充分混合吸附后 ，用蒸馏水洗至无脲酶活性检 出时为止 ，然后在 4O～5O℃条 件下烘干 ，过 lmm尼龙筛 ，备用 。 1．2 试验方法 向5．00ml脲酶溶液或5．00g样 品中加入 lml甲苯混匀 ，静置 15rain，添加 5Tnl重金属溶液 (浓度见 表 1)后 30minllol，再加入 lOTnl不 同浓度(0．000、0．010、0．025、0．050、0．100molL一1)尿素溶液和 2OTnlpH * 国家 自然科学基金项 目(批准号资助 收稿 日期 ：2002—07—02；收到修改稿 日期 ：2002—11—15