老年肺癌患者外周血单个核细胞hTERT基因表达_0.docVIP

老年肺癌患者外周血单个核细胞hTERT基因表达 【关键词】 肺肿瘤 Expression of human telomerase reverse transcriptase gene in peripheral blood mononuclear cells of lung cancer in elderly patients 　　【Abstract】 AIM: To investigate the significance of the expression levels of human telomerase reverse transcriptase (hTERT) gene in peripheral blood mononuclear cells of lung cancer in elderly patients. METHODS: The expression levels of hTERT were detected in 20 elderly patients with lung cancer and 10 normal elderly subjects by quantitative measurement with RTPCR. RESULTS: The expression levels of hTERT mRNA in the lung cancer patients (0.927±0.115) were significantly higher than those in normal subjects (0.408±0.124, P0.001), without significant correlation with pathological types and clinical stages. CONCLUSION: The quantitative measurement with RTPCR for the expression levels of hTERT mRNA is an effective method in the diagnosis of lung cancer in patients who are not fit for other examinations. 　　【Keywords】 aged; lung neoplasms; human telomerase reverse transcriptase; gene expression 　　【摘要】 目的： 探讨外周血单个核细胞(PBMCs)的人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的表达水平对于老年肺癌的诊断意义. 方法 ： 采用RTPCR定量检测20例老年肺癌患者及10例正常老年人外周血单个核细胞的hTERT的基因表达水平. 结果： 老年肺癌患者hTERT mRNA的水平明显高于正常对照组（0.927±0.115 vs 0.408±0.124, P0.001）. 与病理类型与临床分期无相关性. 结论： 定量测定PBMCs的hTERT mRNA的表达水平是诊断不适合其他检查的老年肺癌患者的有效方法. 　　【关键词】 老年人；肺肿瘤；人端粒酶反转录酶；基因表达 　　0引言 　　老年疑似肺癌患者的明确诊断一直是长期困扰临床医生的实际 问题 . 端粒酶可作为一种肿瘤标记物已在多组 研究 中被证实. 我们研究的目的是探讨外周血单个核细胞(PBMCs)的人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的表达水平对于老年肺癌的诊断意义. 　　1对象和方法 　　1.1对象 　　200201/200412我院住院的老年肺癌患者20例，男15例，女5例，年龄61~82（70±6）岁. 患者依据病史、临床表现、XRay胸片、肺CT，纤支镜、癌细胞学及病 理学 确诊（Tab 1）. 正常对照10例，均为来我院健康体检者，男7例，女3例，年龄62~81（71±5）岁，经健康检查均除外各种恶性肿瘤. 　　1.2方法 　　1.2.1标本采集两组人群于清晨06：0007：00空腹未起床活动时，平卧位采取右肘静脉血3 mL，肝素抗凝, 加入等量的PBS液稀释混均，加至5 mL淋巴细胞分离液上，4℃离心（2000 r/min, 15 min），吸取中间层单个核细胞，-80保存待检测. 　　1.2.2总RNA提取上述细胞利用总RNA的提取系统(II)(total RNA Extraction system II,华美生物工程公司)来提取总的RNA，实验步骤按说明书进行. 将沉淀的RNA进行干燥，用无RNase污染的水将RNA溶解，在A260280测吸光值，要求A260/280≥2.0并 计算 出RNA含量，并用其合成cDNA. 　　1.2.3引物构建端粒酶hTE