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焦磷酸测序法的原理及应用 （Pyrosequencing遗传分析技术） Detection of the light Pyrosequencing 系统平台 Pyrosequencing 系统平台 1. Assay Design 2. PCR扩增 一对扩增引物中的一条带有生物素标记，另一条不带标记。 3. Single Strand Template Preparation 真实的序列：遗传检测的黄金标准 快速的实时输出：1 碱基/分钟 96个样本平行处理能力 新一代的Pyro Gold试剂：表现大为提升 5. Pyrogram Analysis Pyrosequencing技术的特点 得到定量序列结果的技术 极高的准确性 Built-In QC 重现性极佳 通用型技术平台 功能多样，应用领域极广 可以用于任何遗传多态性的分析 甲基化研究的平台 高通量、低成本的快速临床微生物诊断 实验设计灵活 自动化程度高，操作简单 Why Pyrosequencing is quantitative？ Pyrosequencing：Accurate Quantifying What are ”Inbuilt Controls”? Benefits of Built-in Quality Control QC基于周边的序列信息 鉴定的黄金标准 从primer后的第一个碱基开始——