专题一12基因工程的基本操作程序.pptVIP

(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是__________，其合成的产物是________。 (4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是____________________________________________。 【解析】（1）将含有目的基因的DNA与质粒用EcoRⅠ酶切开后，可形成许多有相同末端的DNA片段，再用DNA连接酶连接起来后，可形成目的基因与目的基因、目的基因与载体、载体与载体连接的重组DNA分子，而基因工程所需要的是目的基因与载体的连接物，所以对以上三种DNA分子片段进行分离提纯，以获得基因工程所需要的。 (2)质粒是原核生物细胞中的一种DNA分子，所以对以上连接物，只有载体与载体的连接物能生活在原核生物宿主细胞内。而目的基因与载体连接物、载体与载体的连接物都含有完整的青霉素抗性基因，所以可生活在含有青霉素的培养基上。 (3)目的基因表达时，RNA聚合酶与启动子结合，催化DNA分子转录为信使RNA分子。 (3)目的基因表达时，RNA聚合酶与启动子结合，催化DNA分子转录为信使RNA分子。 (4)为了防止目的基因与质粒表达载体的任意连接，可同时选用EcoRI酶与BamHI酶切割目的基因和质粒，这样形成的目的基因两个末端分别有不同的核苷酸序列，而质粒的两个末端也是分别有不同的核苷酸序列