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病毒RNA/DNA快速纯化试剂盒 TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver. 2.0 用于病毒RNA/DNA快速纯化的试剂盒。可以从浓缩的病毒颗粒或者其他各种临床样本中高效快速提取高纯度的病毒RNA/DNA。采用独特的病毒颗粒裂解系统，由细胞裂解液裂解病毒颗粒释放病毒RNA/DNA，然后使用特殊的相分离法除去杂质，再结合核酸制备膜技术纯化病毒RNA/DNA。全套操作仅需1小时便可得到高纯度的病毒 RNA/DNA,可以用于RT-PCR反应等各种分子生物学实验。 * 质粒DNA小量纯化试剂盒 TaKaRa MiniBEST Plasmid Purification Kit Ver.2.0 适用于质粒（Plasmid）DNA小量纯化。采用传统的SDS碱裂解法，结合DNA制备膜技术，具有高效、快速、方便之特点，全套操作只需1小时便可完成。可从1～4 ml的过夜培养的菌液中纯化得到1～20 mg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280 = 1.8～2.0)，此质粒DNA可直接用于DNA序列分析以及各种酶促反应等。 * DNA片段纯化试剂盒 TaKaRa DNA Fragment Purification Kit Ver.2.0 适用于从PCR反应或其他各种酶促反应中除去酶蛋白、DNA引物、dNTP等。采用DNA制备膜技术，具有高效、快速、方便之特点，全套操作只需15分钟便可完成。每次可纯化多至10 mg的DNA片段（≥100 bp)，回收率高达60～90%，并且纯度高（不含酶蛋白、DNA引物、dNTP等)，可直接用于各种分子生物学实验。 * 第三章 核酸研究技术 * 核酸电泳技术 核酸的分离和纯化技术 DNA限制酶切和连接技术 遗传转化 PCR技术 分子杂交技术 核酸序列的测定 * 第一节 核酸的分离和纯化 * 1、供体的核酸分离 供体细胞/组织 收集(菌体)细胞 细胞破碎 分离总DNA 分离细胞器 分离总RNA 分离细胞器DNA RNA poly(A)RNA 特异性RNA 染色体DNA(组建基因组文库) 一.一般程序 * 载体DNA 感染或转染细胞（病毒型） 转化细菌细胞（质粒型） 分离病毒颗粒 培养转化细胞、收集菌体 病毒载体DNA分离与纯化 破碎细胞 质粒DNA分离与纯化 3. DNA片段的分离 DNA 限制酶切 凝胶电泳分离 特定DNA 片段的回收 2.载体DNA分离 * 1)?凝胶电泳: 2) 光密度值测定: A260/A280=1.8 3) 限制酶切分析: 4. 质量评估 * 1.?酶法 利用某些细胞壁裂解酶使细胞变为原生质体，然后加去垢剂使原生质体裂解。 1) 细菌：溶菌酶 2) 酵母：蜗牛酶、Novozyme234、glusulase、zymolase 等 3)?丝状真菌：Novozyme234、溶壁酶、纤维素酶 4)?植物细胞：纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶 酶法裂解时要注意细胞的生长条件和生长时间，反应时尽可能满足酶的最佳反应条件。 二.细胞裂解 * 1)?压力剪切法：French压力机，酵母细胞，细菌（芽孢和G+球菌除外） 2) 射击破碎法：Braun破碎机，搅切器（blender），混合器（mixer），0.1-0.45mm玻璃球 3) 固体研磨法：将待破碎细胞与玻璃球