植物内生细菌的研究现状-洪永聪-061110.pptVIP

植物内生细菌的研究现状 武夷学院茶学与生物系 辛伟 主要内容 植物内生细菌的概念 植物内生细菌的种类 植物内生细菌的内生定殖 植物内生细菌的生物学作用 前　言 植物病害是农业生产中自然灾害之一，每年病害对农作物产量的损失可达30~40% 植物病害化学农药防治的缺点： 引起病害抗性 杀伤天敌，破坏生态平衡 污染环境 危及人们身体健康 生物防治（biological control）是最具潜力的植物病害安全有效防治措施 前　言 植病生防菌大多数是从土壤或植物根际土壤微生物中分离筛选的 易受外界条件的影响，不易在植物病原菌生存环境中定殖 严重影响它们的实际防病效果，成功的事例不多 前　言 近年来的研究表明，健康植物体内含有大量的内生细菌 内生细菌不仅将植物作为其栖息场所，而且对寄主植物广泛有益的生物学作用 普遍认为，内生细菌是植物病害生物防治的天然资源菌 植物内生细菌具有广阔的理论研究价值和开发应用前景，已成为植物学、微生物学、植物保护学及植物育种学等多学科的研究热点 植物内生细菌的概念 植物内生细菌的研究简史 20世纪30年代以前：争论期 1926年Perotti等在许多健康植物的根组织内发现了细菌，但被认为是污染所至 20世纪50~60年代：定论期 Tervet(1948)和Hollis(1949,1951)从马铃薯、胡萝卜、萝卜、红甜菜、甘薯、番茄和球茎甘蓝贮藏器官等分离获得内生细菌，并进行了分类鉴定 20世纪80年代以后：活跃期 以内生细菌对寄主植物的生物学作用最为引人注目 植物内生细菌的种类 植物内生细菌的多样性 内生细菌存在于单子叶和双子叶植物中，从水稻、小麦、棉花、柑桔、香蕉、甘蔗、马铃薯、甘蓝等农作物、果树、蔬菜中均可分离到内生细菌 从种子、胚珠、块茎、块根、茎、叶及果肉等几乎所有的植物组织都可以分离到内生细菌 植物内生细菌的的多样性不仅在于其宿主植物器官与种类的多样性，也在于细菌本身分类地位的多样性，一种植物可同时定殖许多不同种类的内生细菌 植物内生细菌的种类 植物内生细菌的来源 植物内生细菌的来源很多，而且不同植物、不同细菌种类，其来源可能不同 有的细菌来自植物体表或根际土壤，暂时栖息于植物体内 有的细菌进入植物体内后，可长期在植物体内生存，并可以随种子或无性繁殖材料在植物各世代之间传播，成为后代内生细菌的主要来源 植物内生细菌的鉴定 常规鉴定：形态特征、培养特性、生理生化特征等 分子生物学鉴定：16SrRNA碱基测序、G+C百分比、DNA同源性杂交、原位PCR与16SrRNA多态性分析 细菌自动鉴定系统：如Biolog细菌自动鉴定系统 植物内生细菌的内生定殖 内生细菌在植物体内的定殖 内生细菌在植物组织中的存在方式，可分为四种：依赖性、忍耐性、专一性和定位，不同的植物中内生细菌的存在方式不同 有的内生细菌可以在植物的整个生育期内生活，而大部分内生细菌只存在于植物的某生育期内 内生细菌在植物体内的定殖 内生细菌在植物体内的定殖 内生细菌在植物体内的定殖 内生细菌在植物体内的定殖 绿色荧光蛋白基因（gfp）标记法的优点 作为报告基因，gfp基因表达出来的绿色荧光蛋白（GFP）折叠效率高，可以在多种生物体内表达，对细胞或组织都无毒害作用 GFP的激发不消耗生物能量，不需要任何底物或辅因子 GFP还具有稳定性好，能耐受穿透、毒素、光漂白等，如GFP在甲醛固定、65℃处理半小时以及pH值6~12范围内表现稳定 用荧光显徽镜、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计等仪器可以对标记的目标菌进行实时、原位的监侧或定量计算其荧光强度 植物内生细菌的生物学作用 植物内生细菌的生物学作用 早期主要把内生细菌当作一种污染和潜在病原菌看待；近年来的研究证明内生细菌可以促进作物生长，减轻植物病害症状，甚至认为无菌苗的抗逆性较弱部分原因是缺乏内生微生物 研究发现，内生细菌在与寄主植物长期的协同发展过程中，彼此形成了相互依存、相互作用的生态学关系，植物内生细菌对植物生长发育、抵抗不良外界环境、抵御病虫害等具有广泛的生物学作用 植物内生细菌的生物学作用 按内生细菌对植物的作用效果可分为有益、有害和中性3类 其中大部分对植物的作用是中性的，约5~10%的内生细菌对植物有益，10~20%对植物可能有害或无益 植物内生细菌的防病作用 关于内生细菌的研究主要是集中在内生细菌的有益生物学作用，及内生细菌与寄主植物互作的生态学研究 植物内生细菌由于其与寄主植物具良好的亲合能力，可系统的分布于植物细胞间隙或细胞内，有足够的营养物质，并受到植物组织的保护，可避免外部恶劣环境的影响，相对于植物附生细菌更易发挥生防作用 因此，内生细菌在作物病害生防上的应用广泛受到人们的重视，目