8种有机溶剂对肿瘤细胞的细胞毒作用.pdf

维普资讯 云南大学学报 (自髂科学版 】 2001，23c6)：457--460 CN53—1045／N ISSN0258—7971 JournalofYunnanUniversity 8种有机溶剂对肿瘤细胞的细胞毒作用 ’ 纪舒昱 ．翁稚颖 ，周轶平 ，冯耀宇 ，李玛琳 (1昆明医学院 天然药物药理重点实验室．云南 昆明 650031；2．昆明医学院药学院．云南 昆明 650031) 摘要：实验中常需要有机溶剂溶解水溶性较差的待筛选样品．笔者为抗肿瘤药物体外筛选时选择适宜体积 分数下低毒且溶解性能好的有机溶剂作参考 用改 良M rr法测试 8种常用溶剂对 2种人肿瘤细胞株生长的 影响．甲醇、乙酸乙酯、乙醇、乙二醇、二甲基亚砜(DMSO)、氯仿、丙酮和正丁醇对人肺癌细胞株A549的 Ic5o分 别为350，0．61．209×10—2379×10～，407×103p210×10～．404×10～．262×10～ mi：甲醇、乙 酸乙酯、乙二醇、二甲基亚砜、氯仿、丙酮和正丁醇对人肝癌细胞株BeL一7402的 I(分别为028，089，582 ×10—2967x10 3p5 54×10—28 ． ． 00x103p161x100 结果说明体积分数为0～10％的甲醇和乙 酸乙酯细胞毒性甚徽，宜选用；乙醇、乙二醇选用低于 3％的体积分数；DMSO宜用低于 1％的体积分数；丙酮和 氯仿宜选择低于03％的体积分数；正丁醇的细胞毒性较强，不适合用于筛药中． 美键词：MrT法；甲醇；乙酸乙酯；乙醇；乙二醇；二甲基亚砜；丙酮；氯仿；正丁醇；细胞毒性 中图分类号：R7342；R7357 文献标识码：A 文章编号：0258—7971(2001)06—0457—04 在抗肿瘤药物的体外筛选中，常常碰到许多水 酶以1：1比例配制)进行消化，并接种于96孔板 溶性较差的待筛选样品．尤其是植物提取物，需借 中 助有机溶剂才能溶解．而大多数有机溶剂存在较强 1．2 试剂及药物 MTT：Sigma公司．RPMI一 的非特异性细胞毒性 实际操作中有机溶剂体积分 1640，GIB(如 公司．新生小牛血清，杭州四季青公 数太低，样品溶解不好；体积分数太高．细胞毒性太 司．DMSO(二甲亚砜)，MEREK公司 SDS(十二烷 强，常常掩盖待筛选样品的细胞毒作用，造成假阳 基硫酸钠)、盐酸、异丁醇、乙二醇、乙醇、甲醇、氯 性结果，给筛选带来 丁一些困难 为此我们用不同 仿、乙酸乙酯 、正丁醇及丙酮，均为国产 (分析纯) 的肿瘤细胞株，测定几种常用有机溶剂不同体积分 二氧化碳培养箱，Heraeus公司．96孔微板酶标仪 数下的细胞毒作用，通过 比较发现毒性低、溶解性 (EL一340)，美国Bioteck公司．96孔培养板，美国 能好的有机溶剂．以供抗肿瘤药物体外筛选 中选择 Nunc公司 有机溶剂时参考 2 实验方法 1 材 料 采用改 良^仉 法 【进行测试 ．取对数生长期 1．1 肿瘤细胞 系 BeL一7402(人肝癌细胞株)、 的BeL一7402，A549细胞株．细胞数调整为 4× A549(人肺癌细胞株)，从中国科学院上海药物研 1O／mL．加入 96孔板中，90 “L／孔．细胞在培养箱 究所肿瘤细胞库引进，并在本室长期传代培养 中放置4h待贴壁后再加待测样品，每孔 10止 ．阴 细胞生长于含 RPMI一1640、谷氨酰胺、碳酸 性对照为等体积的生理盐水．受试样品终体积分数 氢盐及 =15％小牛血清的培养液中．每间隔48h ()为01％，0．3％．1％，3％．10％；细胞在 37℃， 更换一次培养