细胞培养工程02B相关细胞生理.pptVIP

* 前言 决定重组蛋白质表达的主要因素 表达载体 表达载体整合位点：宿主细胞染色体转录活跃区低于 3% 克隆筛选 合成蛋白质产物的能力的评估 单位时间内每个细胞分泌蛋白质的数量 经克隆筛选后，细胞株为单克隆，其合表达能力基本上已经达到上限，进一步重复筛选、提高产率的空间不大 过程开发与优化 确定产物合成与细胞生长的关系 通过反应器操作与培养基优化， （1）提高活细胞密度 （2）延长高密度培养时间 * 细胞培养工程 南开大学 * 代谢途径 代谢途径 胞内生化反应是在酶催化作用下完成 胞内生化反应不是独立的，而是相互联系、并接受调节（如负反馈抑制），一个反应的产物往往就是下一个反应的底物，由此构成的一连串生化反应，即代谢途径 细胞培养工程 南开大学 * 生物体内代谢活动主要分类 分解代谢 由较大分子（多糖、蛋白质、脂类等）降解为小分子（如 CO2、NH3、H2O、氨基酸、单糖）的过程 作用 为细胞的生命活动提供能量 为合成代谢提供多种前体物质 合成代谢 由小分子（如氨基酸等）合成大分子（如蛋白质）的过程 作用 产生重要的产物 为机体生长和产物合成提供必要的大分子物质 需要能量 细胞培养工程 南开大学 * 正常机体的能量代谢 在正常机体内代谢受严格调控，处于动态平衡状态 代谢途径中关键限速酶的活性调节（酶活性）和合成调控（酶数量）是代谢调节主要方式 机体内代谢调控层次