第四章2载体.pptVIP

* 第一节 基因克隆的概念和基本步骤 第四章 基因克隆 第二节 工具酶 (RE, DNA ligase, etc) 第三节 载体 第四节、目的基因的制备 第五节、获得重组DNA：目的基因与载体的体外连接 第七节、 DNA重组体的筛选和鉴定 第八节、 目 的 基 因 的 次 级 克 隆 第六节、转化:将重组DNA分子导入宿主细胞 DNA Cloning 过程 工具 Target DNA fragment RE digestion Plasmid RE digestion Ligation Recombinant plasmid Target DNA fragment Transformation E.Coli without vector die E.Coli with vector grow Culture in the medium containing antibiotic *为什么需要载体? –– 外源片段在宿主细胞内不稳定,无自主复制能力 –– 外源片段无明显的遗传标记以区分阳性细胞 基因克隆的过程 一、什么是载体？ 能够携带外源基因在受体细胞中复制或表达的DNA分子。 Vectors are DNA molecules which can carry the inserted foreign gene to enter host