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研究生物转化的几种常用方法 第四章 研究生物转化的几种常用方法 间歇培养法 洗涤均丝悬浮法（静息细胞法） 孢子转化法 原生质体实验法 遗传特性诱变法 同位素示踪法 间歇培养法（Batch culture) 这种方法能够比较直接而简单地筛选能否具有转化某种化合物的活性菌株。 静息细胞法 为了排除原培养基中自身的代谢产物对不同生长阶段转化的影响，常常用洗涤的静息细胞来代替发酵液中的生长的细胞，即将不同生长阶段的细胞取出，洗去沾染的原培养液及其代谢产物，然后把细胞悬浮在人工转化系统内，在一定条件 下进行生物转化。 孢子转化法 真菌的分生孢子和子囊孢子，往往含有的酶活力高，且常常用于生物转化。 细菌的内生孢子（芽孢），一般无转化活性。 孢子收集法： 采用Tween80等表面活性剂从培养基表面洗下，稀释到10－4，过滤，除均丝，离心收集孢子，－20℃保存。 转化方法 相似于静息细胞法。 不采用完全培养基，只选用缓冲液或含有葡萄糖一类能源的物质即可。通常转化时使用的孢子浓度为108－109个/ml，转化pH一般为5-6 原生质体试验法 方法 通过溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶等脱去细胞壁，获得原生质体。 将原生质体悬浮于高渗稳定液中，添加前体物质，进行喂养试验，观察结果。 优点 排除了细胞壁通透性障碍。 保全了整体细胞的内酶系统 避免了无细胞抽提法中，用破碎细胞而损坏了酶体系，从