第十二讲DNA文库的构建.pptVIP

基因组文库和cDNA文库的构建 第一节 基因组文库的构建 1 基因组文库(genomielibrary): 将某一生物基因组DNA片段化并全部克隆后所获得的重组子群体的总称。 作用：获得特定基因。 2 基因组文库的类型 根据所选用的载体可以分为： 质粒文库 噬菌体文库 黏粒文库 人工染色体文库 3 构建基因组文库应满足的条件 3.1 文库的完整性 要包含基因组的完整序列信息，通过产生一系列一定大小、覆盖全基因组的DNA片段的重组克隆来实现。 3.2 基因组信息的可重建性 通过建立叠连群(contig)重建完整序列信息。 3.3 文库的大小 即文库中应包含的独立重组子数。 一般来说，DNA片段长，完整基因组文库所含的克隆数越少。反之，越多。 基因组越大，文库应包含的克隆数越多，反之，越少。 4 基因组文库的质量标准 一个理想的基因组DNA文库应具备下列条件： 重组克隆的总数不宜过大，以减轻筛选工作的压力 载体的装载量最好大于基因的长度，避免基因被分隔克隆； 克隆与克隆之间必须存在足够长度的重叠区域，以利克隆排序； 克隆片段易于从载体分子上完整卸下； 重组克隆能稳定保存