第二章酶生物合成的基本理论.pptVIP

湖州师范学院 Ming 第一篇 酶的生产 第二章 酶生物合成的基本理论 酶的生物合成（enzyme biosynthesis）是通过细胞的生命活动合成各种酶的过程。 细胞内酶的生物合成要经过一系列的步骤，需要诸多因素的参与，在复制、转录、翻译、加工和组装过程中，这些因素都对酶的生物合成起到调节控制作用。 第一节 RNA的生物合成——转录 中心法则 中心法则 真核生物的RNA聚合酶 起始位点的识别 recognition 转录起始 initiation 链的延伸 elongation 转录终止 termination 转录后加工 modification RNA合成过程 转录的主要过程（以大肠杆菌为例） 一、转录的起始 1、全酶的形成：核心酶与?因子结合成为全酶。 2、酶与模板结合：全酶与模板DNA结合生成不稳定的复合物，全酶可沿着模板DNA移动，寻找识别位点。 3、酶与启动子结合：全酶与模板DNA的启动子结合生成酶与启动子的复合物。 4、模板DNA局部变性：DNA的双螺旋部分解链。 5、转录开始：全酶移至转录起始位点，生成稳定的酶-DNA复合物，按照碱基互补原则结合进一个核苷三磷酸，转录正式开始， ?因子释放出来。 转录的主要过程（以大肠杆菌为例） 二、RNA链的延伸 1、从起始阶段到延伸阶段，RNA聚合酶分子的构象发生变化。 2、RNA链的延伸沿着5’至3’的方向进行。延伸的速率大约为50 nt/s. 3、RNA聚合酶不具有外切核酸酶的活性，无校对功能，RNA生物合成的差错率为10-4-10-5，比DNA复制的差错率10-9-10-10大的多。 转录的主要过程（以大肠杆菌为例） 三、RNA链合成的终止 1、模板DNA分子上每一个基因或每一个操纵子都含有一个终止信号-终止子。 2、有些RNA链合成的终止还需要终止因子（termination factor）- ρ因子的帮助。 转录的主要过程（以大肠杆菌为例） 四、RNA前体的加工 经过转录获得的产物并非成熟的RNA分子，而是RNA前体。 （一）剪切反应：是指从RNA前体的末端切去一定大小的RNA片段，而得到成熟的RNA分子的加工过程。 （二）剪接反应：是指将RNA前体的间插序列除去，并把两端的外显子连接起来，形成成熟RNA分子的加工过程。 转录的主要过程（以大肠杆菌为例） （三）末端连接反应：末端连接反应是指在RNA分子的3’末端或5’末端连接上特定的寡核苷酸，而形成成熟的RNA。 1、在tRNA的3’末端加上CCA-OH 2、在mRNA的5’末端形成‘帽子’结构。 3、在mRNA的3’-末端连接poly A尾巴。 4、在tRNA的5’末端加上甲基鸟苷酸。 转录的主要过程（以大肠杆菌为例） （四）核苷修饰反应 成熟的tRNA分子中含有许多修饰核苷。这些修饰核苷是在tRNA加工过程中，通过各种酶的作用而生成的。 第二节 蛋白质的生物合成——翻译 定义 蛋白质合成的几个要素 The ribosome composition of prokaryotic and eukaryotic cell 一、遗传密码 （一）遗传密码的概念 （二）遗传密码的特点 1、遗传密码的简并性：一种氨基酸具有一个以上的密码子的现象称为简并性。 2、遗传密码的通用性：不管在体内还是体外，不管是何种生物，遗传密码子都是通用的。 3、密码子和反密码子的相互作用 三联体密码 二、蛋白质的生物合成 （五）蛋白质前体的加工 1、N端甲酰甲硫氨酸或甲硫氨酸的切除 2、二硫键的形成与重排 3、肽链的剪切 4、氨基酸侧链的修饰 5、肽链的折叠（分子伴侣、折叠酶） 6、亚基的聚合 第三节 酶生物合成的调节 酶在细胞内的含量取决于酶的合成速度和分解速度。细胞根据自身活动需要，严格控制细胞内各种酶的合理含量，从而对各种生物化学过程进行调控。 酶浓度调节的化学本质是基因表达的调节。在细胞内，所合成的酶的种类及数量是由特殊的基因信息决定的。DNA所携带的酶蛋白遗传信息，需要通过转录和翻译而合成酶蛋白。在细胞内进行的转录或翻译过程都有特定的调节控制机制，其中转录的调控占主导地位。因此，基因表达的调控主要在转录水平上进行。 组成酶：在细胞中的量比较恒定，环境因素对这些酶的合成速率影响不大。 如：DNA聚合酶、RNA聚合酶、糖酵解途径的各种酶等。 适应酶（调节酶）：在细胞中的含量变化很大，其合成速率明显受到环境因素的影响。 如：大肠杆菌β-半乳糖苷酶。 调节基因(regulator gene)： 可产生一种组成型调节蛋白(regulatory protein) （阻遏），通过与效应物(effector) （包括诱导物和阻遏