第十一章海洋药物开发中的生物技术.pptVIP

1．5 工具酶和其它材料 Taq DNA聚合酶、大肠杆菌DH5a为本实验室保存． 1．6 PCR反应反应参数为94℃变性3 min后，94℃ 30 s，56℃ 40 s，72℃ 40 s，共3O循环． 1．7 PCR产物电泳及胶回收用Omega Bio-tek的Gel Extraction Kit试剂盒回收PCR产物电泳目的条带 1．8 DNA 重组 胶回收产物用Pmmega公司pGEM—T Easy Vector Systems，4℃连接过夜，转化大肠杆菌DH5 ，氨苄青霉素抗性筛选阳性克隆，EcoR I酶切鉴定重组子 1．9 重组质粒DNA的纯化 用Omega Bio．tek的Plasmid Miniprep Kit提取重组质粒以供测序用． 1．10 重组质粒的测序 采用Applied Biasvstem 377DNA Sequencer进行DNA自动测序 1．11 序列比较和功能预测用Blast和Clustalw分析软件 * * * * * * * * * * * * * * * *   * *  * * * 河豚毒素(TTX)又称原毒素(Spheroidine)、东方豚毒素(Fugu poison)、蝾螈毒素(Tarichatoxin)，是一种剧毒无比的天然神经毒素，广泛分布于河豚、章鱼、海星、蝾螈等多种生物体内”～1o]．1Trx的起源问题