莲子胚培养再生植株及原生质体分离的研究.pdfVIP

种子生产 蔡颖欣等：莲子胚培养再生植株及原生质体分离的研究 莲子胚培养再生植株及原生质体分离的研究 蔡颖欣， 汤字环， 邵晓宇， 黄 霞 (中山大学生命科学学院／广东省热带亚热带植物资源重点实验室， 广东广州510275) ResearchesonPlant from and Isolation Regeneration EmbryosProtoplast ofLotus(Nelumbo nucifera) CAI Yuhuan，SHAO Xia Yingxin，TANG Xiaoyu，HUANG 摘要：以莲子胚为外植体建立江溪红莲离体培养再生体系， 察到芽增殖现象。以江溪红莲的胚为材料进行组织培 并以所得再生植株的展开叶片为材料，摸索原生质体分；离的条 养，首次研究不同生长调节物质组合对芽增殖的影响 件，为荷花体细胞杂交育种提供实验基础。结果表明，较理想 以及不同培养方式对再生植株生长状况的影响，以建 的芽增殖培养基为MS+1 6-BA+0．1NAA；成苗 mg／L mg／L 立高效、稳定的荷花离体培养植株再生体系，为种苗工 阶段采用固液双层培养基最适宜。而最佳的叶片原生质体分 厂化生产奠定基础。同时，利用所得到的无菌苗，以其 离酶液组合为2％纤维素酶+1％离析酶+o．1％果胶酶。 展开的幼叶为材料进行原生质体分离条件的摸索，为 关键词： 荷花；芽增殖；植株再生；原生质体 DOI编码： 荷花原生质体培养及体细胞杂交育种提供实验基础。 10．16590／j．cnki．1001—4705．2017．03．125 645．1 中图分类号：S 文献标志码：A 1材料与方法 文章编号： 1001—4705(2017)03—0125一04 1．1 材料 供试材料为江溪红莲(NelumbonUC咖r口Gaertn． 荷花(Nelumbo咒“cifera)为睡莲科多年水生草本 花卉，是一种重要的经济作物。其叶片和花具有相当 Cv．Jiangxi 高的观赏价值；地下茎莲藕和种子莲子是我国常见的 世界提供。 蔬菜；据《本草纲目》记载，荷花全株均可入药[1‘3]。传 1．2 方 法 统的荷花繁殖方法主要采用分藕繁殖，需要进行大面 1．2．1 种子消毒及胚的获得 积的缸栽或者池栽，且繁殖系数较低，大大限制了荷花 莲子用自来水清洗干净，使用园艺剪枝剪剥除莲 种植业的发展[4。6]。为了解决这一问题，研究者们尝试子的外壳(果皮)，用70％的酒精消毒1min，无菌水冲 通过离体培养来进行荷花的快速繁殖。已有的报道多 洗2～3次。然后用0．1％的次氯酸钠消毒8～10min， 以地下茎上的芽为外植体进行离体培养获得再生植 无菌水冲洗5～6次。使用解剖刀将种子的子叶沿中 株[61¨。该体系中外植体消毒困难，而且取材时间(季缝剥开，取出胚(图1A)，并去掉胚上的薄膜。