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石蜡制片实验报告
石蜡制片实验报告
篇一:石蜡切片技术实验报告
题目:石蜡切片技术实验报告
学院:农学院,专业:植物学,姓名:张永丰,学号:2011202010
目的
掌握石蜡切片技术,为以后的科研中切出合格的实验装片做准备。并观察植物叶的横切面内部结构。
材料:已经固定好的女贞叶
方法与操作步骤
一、 脱水:依次使用下列浓度的乙醇脱水
50%乙醇—70%乙醇—85%乙醇—95%乙醇—100%乙醇—100%乙醇 每步两个小时。
二、 透明:依次通过下列试剂进行透明
1、1/2无水乙醇1/2二甲苯(加少许番红粉末,对材料进行附染)两个小时
2、二甲苯两个小时
3、二甲苯一个小时
三、 浸蜡:浸蜡步骤如下
1、将材料瓶中的二甲苯取出1/2,加入剩余二甲苯的体积3/2倍的石蜡液于36℃温箱中处理35小时
2、换用纯石蜡液于60℃温箱中处理2小时,再换一次纯石蜡液处理2小时
四、 包埋与切片
1、在提前准备好的纸盒中放入少量蜡液。
2、片刻后放入材料,避免形成断层还要注意材料摆放的位置和方向。
3、及时将蜡块冷却,防治形成结晶。
4、修块与粘连:将多余的石蜡切除,使蜡块成为梯形;将蜡块一正确的方向粘连在枕木上。
5、切片:利用切片机将蜡块切成薄片。切片厚度为8~10μm,以每分钟40~50转为宜。
6、粘片与展片:在载玻片上滴一滴黏贴剂和一滴蒸馏水用牙签涂匀,将蜡带光面朝下固定于载玻片上,放到展片台上经加温使其充分展开。
7、干燥:将展好的片放于36℃温箱中干燥16小时
五、脱蜡:切片分别经过下列步骤进行脱蜡
二甲苯1/2二甲苯1/2无水乙醇乙醇85%乙醇70%乙醇 5min
六、染色:染色分为番红染色和固绿染色两步
1、番红染色:将载玻片放入盛有番红染液(1%番红,70%乙醇)的染缸中染
色22小时
2、固绿复染:载玻片依次经过一下处理
固绿染液(0.1%固绿,95%乙醇)20秒
3、脱水:95% 1min 100% 1min 100%1min
4、透明:1/2二甲苯1/2无水乙醇 1min 二甲苯 1min 二甲苯
七、封片
中性树胶封片,干燥
八、镜检
将封好的装片在显微镜下观察,并挑选清晰的具有叶横切面典型结构特征的部位拍照。
结果与分析
一、结果分析
二、方法分析
1、包埋是材料放置的位置不正确加之材料较大,
为切片带来较大困难,以致切片效果不理想。
2
、番红染色时间短,观察结果中应该是红色的部位不明显。
3、固绿复染时间短,表皮细胞染色不清晰。
4、材料固定时间过长,或者处理过程中使得材料变脆,切片时把叶的远轴面表皮与叶片脱离,使得观察结果中的很多叶片没有远轴面表皮。
篇二:石蜡切片实验报告
普通生物学实验报告
一、实验名称:番红-固绿二重染制作百合子房永久切片
二、实验材料和用具:
1.材料:新鲜百合花子房
2.试剂:FAA固定液(50%乙醇89ml+冰醋酸5ml+甲醛6ml)、1%番红、1%固绿、各级乙醇(30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%)、脱水剂、石蜡、封片胶。
3.用具:包埋机、切片机、摊片机、快速制片处理仪、恒温箱、解剖刀、镊子、单面刀片、毛笔、乙醇灯、包埋盒、染缸、晾片板、温度计等。
三、实验步骤:
取材→固定→冲洗→脱水→透明→透蜡→包埋→切片→镜检→烤片→染色→树胶封藏→镜检→显微照相
染色程序如下:
*切片在二甲苯中脱蜡,10-20min,直至全部石蜡脱掉; *1/2纯乙醇+1/2二甲苯,5min;
*经无水乙醇、95%、90%、80%、70%、50%、30%各级乙醇各5min,蒸馏水5min;
*1%番红水溶液染色10小时左右;
*用水洗去多余染液;
*30%、50%、70%、80%、90%、95%各级乙醇脱水,5min; *在材料上滴加1%的固绿(95%乙醇配制),染色10-30s;
*95%乙醇漂洗;
*纯乙醇脱水5min;
*1/2纯乙醇+1/2二甲苯,5min,纯二甲苯5min.
四、实验结果:
百合子房横切7微米4倍
百合子房横切 7微米 40倍 注:胚囊内并没有观察到细胞
篇三:小鼠肝脏石蜡切片—实验报告
实验九 显微摄影――小鼠肝脏结构
年级专业 *班 *组 学号 姓名 α β 500μm 1 m 2 100μm I
100μm 4 50μm
图版说明:
图1:小鼠肝脏横切部分结构,示肝小叶(A),静脉血管(B)。
图2:图1(α部位)的放大(转 载于:www.zaIdian.cOM 在 点 网),示肝小叶(C)。
图3:示肝小叶(D)。
图4:示静脉血管(E)。
图5:示肝细胞(F),肝细胞细胞核(G)。
图6
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