药物检测技术第4章药物的杂质检查技术.ppt

柱体为直型不锈钢管，内径1～6 mm，柱长5～40 cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。 装柱方法：有干法和湿法两种，按粒度20μm划分，湿法装柱又称匀浆法。 4、分离装置 紫外检测器: 应用最广，对大部分有机化合物有响应。 作用原理：被分析试样组分对特定波长紫外光的选择性吸收，组分浓度与吸光度的关系遵守比尔定律 特点： 灵敏度高； 线形范围高； 波长可选，易于操作； 对流动相的流速和温度变化不敏感； 应用可变波长检测器（流通池装有紫外或紫外可见分光光度计），以选择最佳检测波长。 5、检测器 b. 光电二极管阵列检测器 紫外可见光度检测器的重要进展； 1021个二极管阵列，各检测某一特定波长，无需停流扫描而观察色谱柱流出物的各个瞬间的动态光谱吸收图 b. 光电二极管阵列检测器 c. 差示折光检测器（differential refractive index detector） 除紫外检测器之外应用最多的检测器； 可连续检测参比池和样品池中流动相之间的折光指数差值。差值与浓度呈正比； 通用型检测器（每种物质具有不同的折光指数）； 灵敏度低（10-7g/ml） 、对温度敏感、不能用于梯度洗脱； 偏转式、反射式和干涉型三种 d. 荧光检测器（fluorescence detector） 受紫外光激发后能够辐射出比紫外光波长较长的光 高灵敏度(比紫外检测器高两个数量级，达10-11g/ml)、高选择性； 对多环芳烃，维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应 e. 电导检测器（electrical conductivity detector） 属电化学检测器，是离子色谱法中应用最为广泛的检测器 作用原理：根据物质在某些介质中电离后所产生的电导变化来测定电离物质的含量。 受温度影响较大，须严格控制温度（池体内放热敏电阻器） 化学抑制型离子色谱体系中可直接检测 单柱离子色谱体系中，背景电导高，极化效应严重，应采用五电极式电导检测器或经改良的两电极式电导检测器。 1. 环境中有机氯农药残留量分析 固定相：薄壳型硅胶(37 ～50? m) 流动相：正己烷 流 速：1.5 mL/min 色谱柱：50cm?2.5mm(内径) 检测器：差示折光检测器 可对水果、蔬菜中的农药残留量进 行分析。 高效液相色谱的应用 2. 稠环芳烃的分析 稠环芳烃多为致癌物质 反相液-液色谱法 固定相：十八烷基硅烷化键合相 流动相：20%甲醇-水 ～100%甲醇 线性梯度淋洗，2%/min 流 速：1mL/min 柱 温：50 oC 柱 压：70 ?104 Pa 检测器：紫外检测器 高效液相色谱的应用 (四)ＧＣ： 主要测挥发杂质及有机溶剂残留量检查 3. 判断：药典中规定的“澄清”，系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂，或未超过0.5号浊度标准液。 4. 溶剂：水、酸、碱、有机溶剂 　* 有机酸的碱金属盐类药物强调用“新沸过的冷水” 　　定　义： 药物生产和贮存过程中，据药物自身性质、生产方法、工艺条件可能引入的杂质。 第三节　特殊杂质检查 旋光法 物理法 化学法 光谱法 色谱法 检查方法 四、分光光度法： 利用杂质与药物对光选择吸收差 异，通常选药物无吸收而杂质有吸收 的波长测Ａ规定Ａ值 (一)紫外分光光度法 １、药物无吸收而杂质有吸收： λ 肾上腺素 (药物) 肾上腺酮 （杂质） 310nm 无吸收 有吸收 规定在310nm处测Ａ0.05 ２、药物与杂质在某一波长有重叠 λ 碘解磷定 分解产物 294nm Ａmax 无吸收 262nm Ａmin 有吸收Ａx 不含分解产物 A294/A262＝Amax/Amin 含分解产物 A294/A262＝(Amax＋0)/(Amin+Ax) A294/A262≥3.1 合 格 (二 )比色法： 　　 供试品＋试剂 对照品＋试剂 比色 Ａ AF710-3目视??比色计 (三)红外分光光度法： 　　 常测药物中无效/低效晶型。 遵循朗伯－比尔定律 数学表达式：A＝kbc A ——吸光度； K ——比例常数； B ——基态原子层的厚度； C ——蒸汽中基态原子的浓度。 基本原理 (四)原子吸收分光光度法： 分析方法----标准曲线法 配制一组含有不同浓度被测元素的标准溶液，在与试样测定完全相同的条件下，按浓度由低到高的顺序测定吸光度