原创力文档- 1、本文档共6页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
日本血吸虫TOR真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达.pdf
中国动物传染病学报2017，25(1)：66．71 ChineseJo砌alofAninlalhlfectious
·研究论文·
日本血吸虫ToR真核表达载体的构建及其在
293T细胞中的表达
宰金丽，马帅，王涛，贾秉光，柴淑梅，张倩，林矫矫，傅志强
(中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241)
I酶切位点，构建真
摘要：本研究扩增到日本血吸虫鼍汀OR完整的蛋白编码区并将其克隆到pxJ40．FLAG载体的砌dⅢ、劢o
westem
blot检测其在293T细胞中的表达情况。测序结果表明墨厂roR蛋白编码区为1245
成功。转染293T细胞48
h后，应用间接免疫荧光染色可观察到转染重组质粒的细胞有特异性绿色荧光，空质粒对照则未见。实
6
时荧光定量PcR结果显示，在转染质粒pxJ40．FLAG．TORh后彰TOR蛋白的基因已有转录，至转染24h时转录水平最高，随后
开始降低。westemblot结果显示s广r0R蛋白分子量约53
可以在293
T细胞中表达，为进一步研究s广roR蛋白的生物学功能和DNA疫苗打下了基础。
关键词：日本血吸虫；TOR蛋白；基因克隆；真核表达
中图分类号：s852．735 文献标志码：A
CoNSTRUCTIoNoFEUKARYoTICEXPRESSIoN
VECToROF
SC丑眄聊D!A盈A彪PD脚功ZToRANDITSEXPRESSIoNIN293TCELLS
zAI
Jin-li，MAShuai，WANGTao，JIA Shu-mei，ZHANG
Bing—guang，CHAI Qian，LINJiao-jiao，
FU
Zhi-qiang
200241．Cht㈣
(S地nghmⅦtenna哆＆searchInsmu把，CAAs，shangh(1i
Abstract：The were cDNA PCRandcloned
DNA丘agmentencoding抽由fDsoma却on缸啪TORpmteinampli6ed仔omtemplatesby
into I toconstmctthe recombinant
pXJ40一FLAGtllrough既口dIII、励o euk哪oticeXpressionplasmidpXJ40一FLAG—TOR．111eplasmid
wasverified and仃ansfectedimo293Tcells．The ofthe in293TceUwasdetected
indirect
bysequencing expressiontargetpmtein by
blotand Real-time
PcR．Success如l was the
i㈣onuorescence，Westemquanti协tive eXpressionof卵0R
文档评论（0）