谷胱甘肽S-转移酶(GST)测试盒说明书.PDF

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Beijing Solarbio Science Technology Co., Ltd Solarbio Tel: 010 Fax: 01082 Http:// 谷胱甘肽S-转移酶 (glutathione S-transferase,GST)试剂盒 分光光度法 2-3 注意:正式测定之前选择 个预期差异大的样本做预测定。 货号 :BC0350 规格 :50T/48S 产品内容 : ×1 4 试剂一:液体 瓶, ℃保存。 ×1 4 试剂二:液体 瓶, ℃保存。 ×1 4 5mL 试剂三:粉剂 瓶, ℃保存。临用前加 蒸馏水溶解。 产品说明 : GST是一种具有多种生理功能的蛋白质家族,主要存在于细胞质内。GST是体内解毒酶系统 的重要组成部分,主要催化各种化学物质及其代谢产物与GSH 的巯基共价结合,使亲电化合物变 为亲水物质,易于从胆汁或尿液中排泄,达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外 的目的。因此,GST在保护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功能。此外,因 为GST具有GSH-Px活性,亦称为non-SeGSH-Px,具有修复氧化破坏的大分子如DNA、蛋白质 等的功能。注意,GST催化的反应减少GSH含量,但是不增加GSSG含量。 GST GSH CDNB 340nm 340nm 催化 与 结合,其结合产物的光吸收峰波长为 ;通过测定 波长 处吸光度上升速率,即可计算出GST活性。 自备仪器和用品 : 紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL石英比色皿和蒸馏水。 操作步骤 : 一、 粗酶液提取: 1. g (mL) 1 5~10 0.1g 组织:按照组织质量 ():试剂一体积 为 : 的比例 (建议称取约 组织,加入 1mL 8000g 4 10min 试剂一)进行冰浴匀浆。 , ℃离心 ,取上清置冰上待测。 2. 104 mL 500~1000 1 500 细菌、真菌:按照细胞数量 ( 个):试剂一体积 ( )为 : 的比例 (建议 1mL 300w 3 7 万细胞加入 试剂一),冰浴超声波破碎细胞 (功率 ,超声 秒,间隔 秒,总时间 3min 8000g 4 10min );然后 , ℃,离心 ,取上清置于冰上待测。 3. 血清等液体:直接测定。 二、 测定操作: 1. 分光光度计预热30min,调节波长到340nm,用蒸馏水调零。 2. 25 37 试剂三放在 ℃ (一般物种)或者 ℃ (哺乳动物)保温。 3

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