ELISA检测方法在禽白血病净化中的应用.pdfVIP

失：目前．防控AL的方法是对鸡群进行净化。有 国还未实现商品化。这就给我国大、中型鸡场净 科 关本病危害的研究报道可追溯到十九世纪末期． 化白血病带来了极大困难，尤其近年来。我国陆 技 尽管养鸡者已意识到禽白血病的危害．但由于这 续培养建立了数家SPF鸡场．今后还会不断增开 种病流行所造成的直接经济损失相对较小．所以 发 加．对SPF鸡群AL／SV—gs抗原检查目前主要依 常被人们忽视。直到1997和1998年．J亚群禽白靠进口试剂盒．不仅价格昂贵而且不方便。因此． 血病在世界范围内大爆发．除澳大利亚和新西兰 研制较先进的国产试剂盒是我们当前急需要解 外．世界各国都不同程度地遭受了J型白血病的 决的问题。 袭击．给养禽业造成了巨大的经济损失【1]。目前还 1 ELISA检测方法 没有用于预防和治疗AL的有效疫苗和药物．国 外的做法是对育种核心鸡群进行ALV的检测、蹄 p27蛋白，并用纯化的p27免疫家兔，获得兔抗 选并淘汰阳性鸡只，以达到净化ALV的目的。在 p27高免血清(R12)，并建立了检测鸡白血病病毒 ALV—J发现之前．国外的净化方法是成功的。我 抗原的双抗体夹心ELISA，具有敏感、高效、简便、 国近几年对AL的防控也借鉴了国外的方法．一 快捷及适用于大面积检测的优点．缺点是同时检 些品种的净化也取得了明显的效果12]。在进行净 测到内源性ALv病毒．常使检测结果出现假阳 化的同时．行业内的研宄人员也在进行相关的研 性。但研究表明蛋清中由于内源性ALV的ELISA 究．如针对本地鸡群的净化方法的优化．ALV检 反应假阳性结果很少．不足以影响禽白血病的检 测试剂盒和疫的研发发．ALV的分离鉴定及其序 测．因此可作为理想的检测材料。1983年，L．N． 列测定等．通过这些相关研宄取得的结果。更好的 Pavne等应用ELISA方法对鸡群进行检测．随后 (1985)美国研制成ELISA试剂盒并于市场出售。 作者简介：王广龙(1991一)，男，汉族，海南海口人，硕士研 国内张晶等(1991)建立了检测ALV抗原的 究生．主要从事兽医临床诊断研究． E—mail：937395968@qq．corn 特异性强、重复性好。秦爱建等(1999)用单克隆抗 *。通讯作者：汪善荣(1967一)，男，安徽寿县人，硕士，副 体建立的夹心ELISA也具有很高的特异性．这种 编审．主要从事农业资源研究。 万方数据 兽医帮袭志 技术相结合为主要手段，具体程序是。在禽白血病 流行病学调查的基础上．选定一个比较适合的年 龄．采集育种核心鸡群的泄殖腔棉拭子或蛋清． 进行ALvp27抗原检测，然后将阳性与阴性鸡分 开词养．采集阳性鸡的血清或蛋清接种DF一1细 胞，维持培养9天后检测细胞培养液中的p27抗 原．阳性淘汰，阴性留种。该方案的优点是将 ELlSA检测技术和病毒分离技术相结合，互相弥 补了采用单一检测技术的一些不足。在检测